Как живет собака?

Казалось бы, причем тут условия содержания – «Вон и в клетках живут, и рожают каждые полгода, и ничего!». К сожалению и так бывает. Но собака собаке рознь. И все по-разному реагируют на одни и те же ситуации. Одна – будет спокойно жить и рожать в клетке, а у другой не будет щенков до тех пор, пока с ней не начнут регулярно гулять и хорошо кормить. А бывает и так, что сука начинает нормально рожать после…. Смены хозяина! Да, да были и такие случаи. Например, когда суку цвергшнауцера отдали из питомника, как бесплодную, а у новой, любящей хозяйки она благополучно родила первенцев в весьма почтенном возрасте.

Дело в том, что еще несколько столетий назад природа наделила собак, как и некоторых других млекопитающих, особым механизмом – блокировать функцию продолжения рода при неблагоприятных условиях для потомства. И даже после наступления щенности организм может уничтожить эмбрионы, если суку плохо кормить, содержать в холодном (жарком) помещении, подвергать физическим наказаниям и даже просто игнорировать.

Вот почему первая обязанность владельца племенной собаки – обеспечить ей комфортные условия жизни и хороший уход. И даже вольерные миники не должны быть лишены Вашего внимания, ласки и возможности полноценно двигаться. Не менее важно и качественное питание, но только не перекорм. Толстые суки гораздо чаще остаются пустыми, а если и рожают, то нередко с осложнениями. Нормальный вес, блестящая шерсть, ясный взгляд и достаточный уровень активности – основные критерии правильно выращенной племенной суки.

Все дело в вязке

Очень часто причиной отсутствия щенков становится неправильно проведенная вязка. Даже если Вы все делали по книжкам, считали дни и вязали в те же самые, в которые обычно вязалась ее мать, индивидуальных особенностей никто не отменял.

Возможно, у вашей девочки яйцеклетки созревают на 5-й день от начала течки и тогда к 11-му они уже просто рассасываются. А бывает и так, что овуляция запаздывает и начинается лишь на 19-день, когда Вы уже и не думали ее вязать. Поэтому наш совет – договоритесь с хозяином кобеля о многократной вязке и экспериментируйте. Вяжите собаку и на 5-й, и на 12-й, и на 19-день, ну а дата родов покажет, в какой из них произошло оплодотворение. Точно определить сроки овуляции поможет и любой, опытный, племенной кобель, с нормальным уровнем сексуальности. Он, скорее всего, будет равнодушен к суке до самых «нужных» дней.

Кроме того, остаться пустой подопечная может если:

• Вязка проходила далеко от дома (в другом городе, стране) и она получила сильный стресс во время поездки к жениху. Но на это не обратили внимания и малышку начали вязать сразу по приезду, не дав прийти в себя
• Во время вязки с собачкой жестоко обращались. Например, из-за ее нежелания спариваться
• Вязка произошла на территории суки и кобель заметно нервничал
• Есть существенная разница в размере собак. Причина редкая, но сбрасывать ее со счетов тоже нельзя

А вот отсутствие «замка» во время вязки абсолютно не говорит о ее нерезультативности. Выброс спермы в половые органы суки происходит еще до «замка». Все остальное – обычная физиологическая особенность и не более.

Когда виноват кобель

Как ни крути, но малыши-йорки или цвержата это всегда плод совместных усилий кобеля и суки. И часто именно кобель становится виновником того, что Вы так и не дождались потомства от Вашей девочки.

«Но как же! У него уже вон сколько щенков от других сук. Наверно проблема все же в Шейли…» — Возможно это и так, но даже самый лучший производитель может:

• Переболеть заболеванием половых органов незадолго до вязки с Вашей красавицей (орхитом, простатитом, эпидидимитом и пр.), т.е. именно ей и не повезло. Бесплодие песиков часто провоцируют и самые разные инфекционные недуги. В этом плане кобели даже более уязвимы, чем суки.
• Оказаться «уставшим» , т.е. его слишком интенсивно вязали последние месяц-два, что не могло, не отразиться на способности к оплодотворению. Оптимальной для здоровья кобеля станет вязка с одной сукой в месяц.
• Быть просто старым, а это значит, что число жизнеспособных сперматозоидов у него снижено, как и их подвижность. А если и Ваша любимица старше пяти лет, то риск ничего не получить от такой вязки увеличивается в разы.
• Долгое время находиться в состоянии повышенного сексуального возбуждения, что также может стать причиной бесплодия.

В то же время отсутствие одного яичка (односторонний крипторхизм) вовсе не мешает кобелям быть «многодетными отцами». Однако, аналогичная патология может потом оказаться у их внуков, реже – детей. Не станет преградой для отцовства и некоторая робость мальчика. В природе такой самец, скорее всего, не повязал бы ни одной самки, но на качестве спермы застенчивый характер не отражается.

Зато встречаются и такие уникальные малышки, которые не то, что щениться, вязаться хотят только «по любви». Например, обожают альфа-самцов крупных пород, а «своих» просто не подпускают. И да, иногда они остаются пустыми, если вязка была насильной. В остальных случаях убедится в виновности жениха очень просто. Смените кобеля и только после этого можно делать какие-либо выводы.

Собака больна

Да, Вы совсем недавно показывали девочку ветеринару и он ничего не нашел. И все же неудачная вязка может быть напрямую связана с текущим состоянием здоровья собаки. – «Но как же! Доктор сказал…» — Доктора тоже ошибаются, да и не все болезни имеют явно-выраженную симптоматику. А Вы могли что-то упустить и не рассказать врачу.

Например, не обратили внимания на изменение цвета кала или не заметили папиллому в пасти. А болезни почек у собак диагностировать всегда не просто. Они же не говорят, где у них болит и почему вдруг стало тяжело резвиться с друзьями. Но любой недуг может помешать наступлению щенности либо заставить организм включить все ту же защиту и избавиться от зародышей. Просто для того, чтобы не усугубить состояние животного.

Кроме того, собака может заболеть или стать жертвой паразитов, будучи беременной и тогда жизнь малышей окажется под большой угрозой.

Женские проблемы

Если Вы изначально планируете использовать суку в разведении, то забота о ее репродуктивном здоровье должна начинаться с ее появления в доме. И первой проблемой, с которой могут столкнуться владельцы — это вагинит в период полового созревания малышки. Проявляется он в виде белесых выделений из половых органов, которые собачка активно вылизывает. Заболевание может запросто остаться незамеченным и пройти само по себе, без всяких последствий. Но если в этот момент собака перемерзнет, подхватит инфекцию или перенесет сильный стресс, то все может усугубиться и тогда воспалительный процесс пойдет глубже, а его последствия обязательно дадут о себе знать в будущем.

Если же Вы заметили подобные симптомы, то стоит проконсультироваться с ветеринаром и пройти курс лечения. Однако, мы не советуем сразу и, тем более, самостоятельно, колоть суке антибиотики. В данной ситуации можно обойтись и более щадящей терапией.

Весьма показательны будут и первые течки. Их длительность, частота и особенности станут своеобразными индикаторами состояния половых органов. Насторожить хозяев должны:

• Небольшие промежутки между течками (менее 4-х месяцев)
• Обильные выделения. Особенно если они не прекращаются даже через месяц
• Общее беспокойство собаки, как будто у нее что-то болит
• Ярко-выраженные симптомы ложной щенности после течки (набухание молочных желез, выделение молока, поведенческие нюансы)

Все эти проявления могут быть как симптомами уже имеющихся патологий, так и стать их первопричинами. Ну, а рожать с воспалением матки или кистами в яичниках Ваша красавица вряд ли сможет. Значит при любых опасениях и подозрениях путь у Вас один – на обследование в ветклинику.

Особое внимание нужно обратить на частые течки. Из-за того, что матка не «отдохнула» после предыдущей овуляции и подготовке к беременности, она может оказаться просто неготовой принять оплодотворенные яйцеклетки и отторгнуть их. В этом случае можно попытаться немного удлинить продолжительность цикла с помощью негормональной терапии.

Дать толчок к развитию многочисленных гинекологических патологий могут и осложненные роды. Для мини-пород это тем более актуально из-за слишком крупных для их размеров плодов. И если Вы хотите, чтобы первый помет не стал для любимицы последним, то необходимо заранее учесть все риски и заручиться поддержкой специалиста на период ее щенения.

Гормональное бесплодие

Сука и кобель абсолютно здоровы? Ни УЗИ, ни анализы не показали никаких отклонений, а щенков от них так и нет? – Вероятнее всего дело в гормонах, точнее — в их дисбалансе у одного из родителей. При этом собаки действительно могут быть здоровыми по всем остальным показателям, просто у них недостаточно вырабатываются именно половые гормоны.

И все же совсем без симптомов гормональное бесплодие у сук протекать не может. Чаще всего об их недостатке сигнализирует поздняя первая течка. Например, в возрасте полутора-двух лет. При этом она может проходить без заметных выделений, быть очень короткой, с невыраженной половой охотой. Однако, если течка все же была, значит не все потеряно и получить малышей от такой собаки можно после специального лечения.

Однако, мы не советуем колоть именно гормональные препараты. Для начала лучше использовать стимуляторы выработки собственных гормонов в комплексе с гомеопатическими препаратами и витаминами. Кстати, причина может быть совсем банальной – недостаток витамина Е. В этом случае велик риск не только неудачной вязки, но и гибели плодов.

Не ждите сиюминутного эффекта от лечения. Для восстановления гормонального баланса нужно время и первым показателем того, что терапия была успешной, станет нормальная течка. Ну, а после первой результативной вязки проблемы часто исчезают сами по себе.

Если же Вы, все же, предпочли инъекции гормонов, то велик риск того, что организм просто разучится сам продуцировать нужные вещества и до конца побороть бесплодие не получится.

Бывает и обратная ситуация, когда у производительницы на лицо избыток половых гормонов. На этом фоне у собак часто развиваются миомы, кисты и даже злокачественные образования, и уже они могут помешать любимице стать матерью. Подобная ситуация более характерна для сук после 5-ти лет.

В ситуации с гормональным сбоем у кобеля, вопрос о возможности его использования в племенном разведении решается на основании данных анализа спермограммы. Но помните, что гормональные проблемы могут унаследовать потомки. Поэтому подумайте хорошенько, перед тем, как принять решение о вязке таких собак.

А может она слишком мала?

Это как раз тот случай, когда размер и юный возраст имеют значение. И очень большое. Именно у сук размером мини и супер-мини больше всего проблем, как с родами, так и с зачатием. По сути, их организм и сам понимает, что рожать такой крошке опасно для жизни, вот и сопротивляется, как может.

Плюс именно у таких девочек чаще других бывают проблемы с гормонами и с поздним половым созреванием. И, как назло, многие заводчики свято верят в то, что чем мельче сука – тем раньше ей нужно рожать первый раз. Пока суставы еще подвижные. Чтобы не кесарить… Но если у Вас именно такая крошка, то убедительно просим Вас:

• Никогда не вязать ее до года
• Не пытаться любыми путями и способами добиться от нее помета, если естественным образом она не беременеет
• Вязать малышку только после 200%-й уверенности в ее состоянии здоровья

 А главное помните, что жизнь любимицы дороже самых хорошеньких, породных и ценных щенков. Источник: Club.xdogs.ru

симптомы и стерилизация, когда вязать собак

Той терьеры – это маленькие собачки, которые идеально подходят для содержания в квартире. Уход за ними прост, они подходят даже неопытным владельцам. Большой плюс, что их можно приучить справлять нужду в лоток – тогда не обязательно выходить на улицу в плохую погоду. Эта порода даже занесена в книгу рекордов Гиннеса как самая маленькая. Если у вас самочка, перед вами рано или поздно встанет вопрос, как себя вести во время течки. Об этом и об особенностях породы мы и расскажем в данном материале.

Вконтакте

Facebook

Twitter

Одноклассники

Мой мир

Описание

Эти малыши достигают в размере всего двадцати – двадцати шести сантиметров.

У них высокие лапки, тонкие кости, а их вес может составлять от одного килограмма трехсот граммов до двух килограммов семисот граммов.

Живут такие зверьки в среднем двенадцать – пятнадцать лет. Бывают гладкошерстные и длинношерстные терьеры, первые напоминают оленят, очень подвижны и ничем не пахнут, короткая шерстка блестит и плотно прилегает к тельцу. Вторые покрыты волнистой или прямой пятисантиметровой шерсткой, на ушках бахрома, а на лапках за мехом не видно когтей. В остальном они одинаковы, и вот какими основными особенностями они обладают:

• угловатая мускулатура, неявные округлые колени;
• длинная шейка, голова в виде клина, череп шароообразный, выпуклый и широкий лобик;
• черненькая или коричневая мочка носика;
• прикус в форме ножниц;
• мордочка составляет треть от длины головки, заострена;
• большие и высоко поставленные тонкие ушки в форме треугольника;
• хвостик обычно купируется со второго позвонка;
• глазки темные, навыкате.

Окрас чаще всего встречается шоколадный, черно-подпалый и рыжий, с разными тонами. Реже – голубой, изабелловый, лиловый.

Характер

Эти крохи очень активны, они постоянно находятся в движении, играют, прыгают. В них силен охотничий инстинкт, на природе они даже могут принести вам в качестве добычи мышку или птенчика. Они выносливые, проворные, очень верные и общительные. Любят детей, дружелюбны к другим домашним питомцам. Прекрасно переносят путешествия и обожают всюду бывать вместе с хозяином – многие берут их с собой даже в магазин или кафе, ведь маленькие собачки компактны и помещаются в сумку.

Характер у питомцев в целом хороший, они послушны и хорошо обучаются, умны и хитры. Особенно они становятся хитрыми с возрастом. Их важно правильно воспитывать и дрессировать, потому что они весьма темпераментны.

Если ваш пес старше двух лет, его будет очень сложно перевоспитать, поэтому начинать лучше с раннего возраста. Ему важно уделять внимание, играть с ним, не оставлять надолго одного, иначе он станет злым и нервным. Если вы много работаете, заведите вторую особь противоположного пола.

Периоды течки

Когда самочка созревает, у нее начинается течка, состоящая из нескольких этапов:

• Проэструс. Это первый этап, который характеризуется появлением почти незаметных выделений, он длится примерно десять дней. В некоторых случаях выделений может вообще не быть на протяжении всей менструации, в этом случае лучше показаться ветеринару. Это может быть особенностью организма, а может – патологией. На первом этапе петля набухает, самка начинает метить территорию, привлекая кобелей. В ее моче появляются специальные феромоны, на которые сбегаются самцы. Но к вязке она еще не готова.
• Эструс. Это фаза, в которую может произойти оплодотворение. Теперь девочка старается всеми силами привлечь к себе кобелей, но их не нужно подпускать даже близко, иначе потом не сможете прогнать. Период характеризуется тем, что если собаке случайно дотронуться до задней части тела, она автоматически убирает хвост и задирает таз.
• Метэструс. На третьем этапе процессы в матке начинают возвращаться в норму, самочка уже не подпускает к себе кобелей и агрессивно настроена по отношению к ним. Сейчас в ее теле вырабатываются гормоны, которые помогут выносить потомство, если произошло оплодотворение, и выработать нужное количество молока.
• Анэструс. Период отдыха, когда девочка становится прежней, тихой и ласковой, слушается команд и не ведет себя странно. Так будет продолжаться пять – восемь месяцев, пока снова не наступит первая фаза.

Течка у собак начинается, когда им исполняется восемь месяцев, но может не наступать и до года, это не страшно. Но если она не приходит дольше, обратитесь к ветеринару. В среднем она длится двадцать один день и случается дважды в год. Если период между менструациями больше девяти или меньше восьми месяцев, обратитесь в клинику. Так может проявляться болезнь или гормональное нарушение.

Симптомы

Понять, что у питомицы приближаются месячные, можно заранее, по некоторым признакам. За несколько дней до их начала у нее может изменится настроение, причем в обе стороны.

Она может стать вялой и ленивой, или же активной и игривой, или агрессивной и нервной, или мирной и ласковой. Не стоит ругать ее за всплески агрессии – в этом виноваты гормоны.

Соски перед течкой могут потемнеть и опухнуть, они становятся чувствительными и болезненными, поэтому нужно осторожно брать терьера на руки. У малышки просыпается зверский аппетит, она выпрашивает кусочки и готова есть днями напролет. Иногда, напротив, аппетит снижается. Любые изменения должны вас насторожить.

Что делать?

Обычно тои не нуждаются в особом уходе в этот естественный для них период. Однако, внимание им уделять стоит. Больше ласки, понимания и любви, и все пройдет отлично. Кроме того, чтобы сберечь мебель, лучше приобрести в зоомагазине специальные трусики и надевать их на собаку с обычной ежедневной прокладкой. На улице или перед лотком их снимают.

Во время прогулки держите самку на коротком поводке, иначе может произойти незапланированная вязка. Даже на полминуты ее не стоит оставлять одну, не давайте ей бегать без поводка. Еще лучше – вовсе не выпускать ее во двор в это время. Следите, чтобы она не сидела на грязном, холодном или пыльном. Нельзя ей купаться в озерах и речках — можно подхватить инфекцию.

Когда вязать?

Ни в коем случае нельзя планировать вязку на первую течку – это вредно для организма питомицы и может привести к очень плохим последствиям. Лучше всего проводить случку, когда ей уже исполнилось пятнадцать месяцев.

После того, как она достигнет восьмилетнего возраста, ей тоже нежелательно рожать. Старайтесь не допускать вязок с дворовыми кобелями. Во-первых, к беременности нужно подходить ответственно, а во-вторых, папаша крупной породы может породить больших щенков, которых маме будет трудно вынашивать.

Насчет вязки договариваются заранее, вам нужно выбрать самца с хорошими внешними данными, здорового и опытного. Спросите у заводчика, нет ли у него наследственных заболеваний, какая у него генетика. Конечно, если у вас дама, участвующая в выставках и получающая награды, кавалер ей нужен соответствующий. От родителей-медалистов получаются кутята шоу-класса. Если дома у вас есть свой пес, то первое время следует держать его в другой комнате, а подпускать только во время второй фазы.

Перед случкой желательно дать собачке антигистаминный препарат, иначе ее потомство может заразиться глистами еще в утробе, на эмбриональной стадии развития. Лучше всего везти ее на свидание утром, перед этим плотно не кормить. А вот мальчику следует давать накануне много мяса и продуктов с высоким содержанием белка.

Если на первой встрече молодожены не понравились друг другу и не хотят общения, лучше не настаивать и свести их на следующий день – возможно, тогда они уже привыкнут друг к другу и будут более лояльны.

Стерилизация

Если вы не планируете заводить щенят, а течка любимицы для вас крайне нежелательно, логичным решением будет стерилизация. После этого у собаки не будет менструации, скачков гормонов и желания размножаться. При этой операции вырезаются все внутренние половые органы, то есть матка и яичники. Перед этим нужно обязательно проконсультироваться с ветеринаром.

Благодаря такой процедуре можно значительно снизить риск развития онкологии. К тому же, стерилизованные особи на пару лет дольше живут. Но им требуется составить особый рацион или покупать специальные корма с необходимыми витаминами и микроэлементами и с низким количеством соли. Больше уход ничем не отличается от обычного.

Расскажите друзьям

истории красноярцев, уцелевших после нападения бездомных псов / Новости общества Красноярска и Красноярского края / Newslab.Ru

С начала года в Красноярске произошло сразу несколько нападений бродячих собак на людей. Причем своры псов появляются в каждом районе — вне зависимости от удаленности от центра города. Мы собрали реальные истории нападения собак на прохожих, узнали у властей, почему в ближайшее время ситуация вряд ли изменится, и спросили у кинолога, как поступать с бродячими собаками. Как оказалось, ничего хорошего нас не ждет.

«Там целая стая!», «Окружили на остановке!», «Напали и покусали!» — все чаще такие сообщения попадаются в красноярских соцсетях. Сложно найти жителя города, который бы ни разу не сталкивался с опасной собачьей стаей.

Красноярка Светлана, которая работает в вагонном депо, рассказала Newslab об одном таком показательном случае. На нее напала стая собак прямо возле работы, где животные устроили себе «лежбища». В конце января около 10 утра Светлана шла к себе в вагон привычным маршрутом. В какой-то момент ее окружила стая из 10 собак — 6 взрослых и 4 подросших щенка.

«Я увидела, что они идут, замедлила шаг. Тогда они окружили меня, сначала начали просто лаять. А потом уже и покусывать со всех сторон. Помню, что подумала только: „Ну, все, конец мне!“. И тут смотрю, мужчина идет. Я закричала, он мне и помог, начал камнями от псов „отстреливаться“. В итоге удалось отогнать стаю, и мы убежали», — вспоминает Светлана.

Последствия обнаружила не сразу: только через пару дней на ногах заметила синяки и небольшие прокусы. Но в больницу обращаться было некогда и вроде в этот раз обошлось без заражения.

Теперь женщина ходит на работу в обход — через здание железнодорожного вокзала. Говорит, что это далеко не единственное нападение. Каждый месяц среди работников ходят истории — то мужчину повалят, куртку порвут; то кого-то окружат и он тоже отбивается камнями.

Светлана говорит, что в службу 005 они на работе жалуются постоянно, но толку мало. А самостоятельно ничего сделать не могут: отстреливать животных нельзя, а забирать или пристраивать псов никто не хочет.

Чуть больше месяца назад в частном доме возле «Столбов» стая собак уничтожила домашнее хозяйство. Псы влезли ночью в ограду и задрали двух овец и трех кроликов. Кроме животных, никто не пострадал, но семья лишилась ценного для нее хозяйства. Через месяц депутаты Горсовета подарили семье несколько кроликов.

Собаки загрызли кроликов и овец в Красноярске

«В результате рейда бродячие животные отловлены и помещены в приют», — отчитались тогда депутаты. На этот раз службе 005 удалось выполнить свою задачу.

Красноярка Юлия Попова в начале февраля встретилась с псом возле БСМП. Целой и невредимой ей уйти не удалось — собака укусила, потребовалось лечение. Животное напало сзади и прокусило голень. Девушка попала в травмпункт, где рану обработали и прописали уколы на ближайшие месяцы. Из-за этого чуть не сорвалась долгожданная поездка пострадавшей.

Пару недель назад в Академгородке стая собак напала на женщину прямо возле автобусной остановки. Она просто шла по пешеходной дорожке, когда ее окружила стая из 8 собак. Они начали на нее лаять, а одна набросилась. Серьезных травм прохожая не получила — её спас проходящий мимо очевидец. Но пес успел разорвать женщине пальто.

Регулярно «пасущиеся» в Академе стаи видят в разных местах. Жители рассказывают о нападении возле остановки «Лесная», возле зданий институтов леса и химии, возле гаражей и т. д. В службу 005 они звонят регулярно, но ситуация от этого не меняется.

Мэрия регулярно выдает отчеты и релизы о том, что делают, чтобы спасти горожан от нашествия бездомных псов. Для них строят приюты, их отлавливают, лечат, стерилизуют и отпускают, агрессивных и больных усыпляют. Власти города идут навстречу зоозащитникам и делают процедуру отлова и передержки максимально гуманной. По правилам, на улицы выпускают только здоровых и неагрессивных. Но злые псы, которые защищают свою территорию, свое потомство или же просто «играют», в том числе и с людьми, все равно держат в страхе дворы и микрорайоны.

В 2018 году в Красноярске провели перепись всех бездомных собак. В итоге их оказалось около 10 тысяч особей. Отловить же за год удалось около 1300 собак, и большую часть из них отпустили обратно на улицы города.

«Проблема с бездомными собаками — очень сложная. Так как мы сами просто не в состоянии придумать максимально эффективного способа борьбы, то ориентируемся на советы ученых. По их данным, истреблять собак бессмысленно, так как популяция самовосстанавливается, да еще и с запасом. Поэтому их нужно стерилизовать — так число особей будет сокращаться. Это, конечно, произойдет не сразу — не за год и не за два, но, если верить ученым, число собак все же уменьшится со временем», — рассказала представитель департамента горхозяйства Светлана Трушкова.

Кроме того, более целесообразно выпускать чипированных животных на те же места, откуда их забрали. Так они будут охранять уже знакомую территорию от других собак. Если же отпускать их в другое место, то на их прежнем месте появится уже новая стая.

По словам кинологов, поведение бродячей собаки предсказать очень сложно. Причин, по которым она нападает, несколько. Это может быть охрана территории, защита щенков, находящаяся рядом собака с течкой — все это влияет на настроение псов и их отношение к прохожим.

Человек может вообще не давать никаких поводов для нападения собак — просто идти и думать о своем, но при этом, например, не так пахнуть с точки зрения животного.

Красноярский кинолог с многолетним опытом дрессировки посоветовал не бегать от собак, не прикармливать их и строго-настрого запретить детям подходить к животным на улице.

«Все эти слова о том, что нужно приучать ребенка к общению с животными — полный бред. Запомните — нельзя подходить к бродячим собакам, а без разрешения хозяина — к чужим и незнакомым животным», — предостерег всех кинолог.

Нападения собак в разных регионах России

Кроме того, по мнению специалиста, регулировать численность популяции бездомных собак нужно. Сами по себе бродяжки никуда не денутся. При этом никто не призывает убивать собак, речь идет о том, что их нужно убрать с улиц Красноярска.

Материалы по теме

«Без искусственной регуляции путем сокращения числа собак на улицах они так и будут плодиться, сбиваться в стаи и нападать на людей», — поделился своим мнением кинолог, попросив не называть его имени из-за нездорового общественного резонанса, сопровождающего в последнее время все дискуссии о бродячих собаках в Красноярске.

Но при этом важно понимать, что и самим собакам, конечно, не становится лучше от того, что они живут на улице. Часто выброшенные и забытые животные просто не приспособлены к дворовой жизни. Кроме того, на бесхозных собак часто устраивают охоту живодеры и догхантеры. Страданиям животных нужно положить конец — и проще всего это сделать, забрав их с улиц в более благоприятную среду.

Пока же речь идет о везении — и везет тем собакам, которые хотя бы на время попали в «передержку» — о них позаботятся и, может, найдут хозяев. Остальные же остаются сами по себе в борьбе за выживание в суровых условиях.

Получается, что, как ни крути, жертвой в этой ситуации остается не собака, а все-таки человек. Истреблять собак никто не хочет — это негуманно, и эта позиция понятна. Но и то, как сейчас работают с бездомными животными, должного эффекта не приносит. Горожанам остается лишь самим защищать себя — избегать стай собак, отбиваться в случае нападения и дрожащими руками набирать 005. И сколько это будет продолжаться — никому не известно.

Интернет-газета Newslab

границ | Стадия цикла эструса имеет решающее значение для интерпретации поведения социальных взаимодействий самок мышей

Введение

В 1993 году ученые NIH решили потребовать включения женщин в клинические испытания в соответствии с Законом о возрождении NIH (NRA), утверждая, что исключение женщин из клинических исследований проблематично из-за широких последствий биологических половых различий. NRA добилась успеха в этой области — за годы, прошедшие с момента ее создания, участники клинических исследований почти достигли гендерного паритета.К сожалению, предвзятость по признаку пола сохраняется в исследованиях на животных, как утверждается в уведомлении Национального института здравоохранения (2015) Guide (NOT-OD-15-102). Самки животных по-прежнему обычно исключаются на том основании, что они по своей природе более изменчивы, чем самцы, из-за колебаний гормонов в течение их эстрального цикла, который у мышей обычно длится 4 дня (Beery and Zucker, 2011). Хотя вопрос о влиянии цикла эструса на поведение не был полностью решен, исследователи по-прежнему часто ссылаются на потенциальную изменчивость, которую он может привнести, в качестве основной причины исключения самок животных (Prendergast et al., 2014).

Исключение самок животных из исследований имеет широкие последствия для биомедицинских и нейробиологических исследований. Несмотря на известные половые различия в распространенности и проявлении некоторых нейропсихиатрических расстройств, включая депрессию и тревожные расстройства, самцы животных часто используются в неврологии и исследованиях поведения, исключая самок (Beery and Zucker, 2011). Кроме того, во многих статьях в различных областях вообще не указывается пол испытуемых, не являющихся людьми (Kilkenny et al., 2010; Бири и Цукер, 2011). Распространенность этой предвзятости по признаку пола опровергает слишком распространенное предположение, что данные, полученные от мужчин, могут быть непосредственно перенесены на женщин. Учитывая обычно наблюдаемый половой диморфизм в нескольких нейропсихиатрических и поведенческих областях, исследователи, включающие животных только одного пола, могут ошибочно обобщить связанные с полом эффекты и не наблюдать другие.

Учет поведенческих различий, связанных с циклом течки, остается важным шагом в поощрении исследователей к использованию животных обоих полов.Всеобъемлющая литература, каталогизирующая такие поведенческие половые диморфизмы, могла бы стать мощным инструментом для исследователей, в противном случае склонных отказаться от использования самок в своей работе. В то время как литература о влиянии цикла течки на поведение обычно используемых лабораторных животных остается относительно скудной, многие недавние исследования были направлены на решение этой постоянной проблемы.

Обзор 293 журнальных статей, посвященных оценке поведенческих, морфологических, физиологических и молекулярных признаков у самцов и самок мышей, показал, что самки не были значительно более изменчивы, чем самцы, ни по одному из оцениваемых показателей (Prendergast et al. , 2014). Кроме того, обзор 311 журнальных статей Becker et al. (2016) обнаружили, что вариабельность функций мозга в нескольких областях существенно не различалась между самцами и самками крыс. Хотя эти обзоры не указывают на значительные различия в поведении и функциях мозга между мужчинами и женщинами, поведенческое исследование, проведенное Meziane et al. (2007) обнаружили зависящий от штамма эффект изменчивости поведения на разных стадиях цикла эструса. В то время как самки мышей BALB/cByJ демонстрировали значительную вариабельность поведения в зависимости от стадии эстрального цикла в тестах «открытое поле», «отдергивание хвоста» и «подвешивание за хвост», самки мышей C57BL/6J (C57) демонстрировали стабильное поведение на протяжении всего эстрального цикла в открытом поле. поле и отдергивание хвоста, но тест подвешивания за хвост показал отчетливую изменчивость (Meziane et al., 2007).

Эти статьи дают представление о потенциальном влиянии цикла эструса на поведенческую и неврологическую изменчивость у самок животных, однако литература, в которой исследователи отслеживали цикл течки во время поведенческого тестирования, остается в лучшем случае скудной. Чтобы решить эту проблему поведенческой изменчивости в течение цикла течки, мы провели серию поведенческих тестов с использованием свободно циклирующих самок мышей C57, отслеживая их цикл эструса с помощью вагинального лаважа и цитологической оценки (рис. 1A-E).Здесь мы сообщаем о влиянии пола (самцов и самок мышей) и цикла течки на различные поведенческие задачи [3-камерное социальное взаимодействие (SI), приподнятый крестообразный лабиринт (EPM), доска с отверстиями, распознавание новых объектов (NOR ) и rotarod] обычно используются в лабораториях фенотипирования мышей для определения восприимчивости этого поведения к гормональным колебаниям.

Рисунок 1 . Хронология цикла эструса у мышей. Цикл течки у мышей длится 2–8 дней, как показано на гистограмме, представляющей продолжительность цикла течки для n = 41 самок мышей (E) , и представлен четырьмя отдельными стадиями: проэструс (A) , течка (B) , диэструс (C) и метэструс (D) . Каждую стадию цикла различают с помощью вагинальной цитологии и идентификации определенных типов клеток (лейкоциты — желтая стрелка, ядросодержащие эпителиальные клетки — голубая стрелка, ороговевшие эпителиальные клетки — белая стрелка). Мыши в проэструсе и течке сексуально восприимчивы (SR), а мыши в диэструсе и метэструсе невосприимчивы (NR). (F) Временная шкала поведенческого тестирования показывает порядок выполнения поведенческих задач. Сначала выполнялись поведенческие задачи, связанные с тревогой (красные), чтобы предотвратить какое-либо влияние обработки на поведенческие результаты.Затем последовали тесты на обучение и память (синие), а затем тесты, связанные с общительностью (зеленые). Серые стрелки указывают на то, что последующее поведенческое задание было выполнено по крайней мере через 24 часа или неделю спустя. Черные стрелки означают, что следующее задание было выполнено по крайней мере через одну-две недели. Синяя стрелка указывает на то, что тестирование с вращающимся стержнем проводилось через 24 часа после тренировки с вращающимся стержнем.

Методы

Животные

мыши C57BL/6J [Лаборатория Джексона (Бар-Харбор, Мэн, США)] содержались в однополых группах по 3-5 особей с доступной пищей и водой ad libitum .Мышей содержали при 12-часовом цикле свет/темнота (свет включается с 07:00 до 19:00) при 23°C и контролируемой влажности (45–55%). Все эксперименты были одобрены институциональным комитетом по уходу и использованию животных (IACUC) в Бостонской детской больнице и проводились в соответствии со всеми рекомендациями NIH по гуманному обращению с животными. Мышей тестировали по всем парадигмам поведения между 60 и 90 днями после рождения (P60–90). Самцов и самок мышей тестировали в разные дни, чтобы учесть чувствительность к феромонам во время поведенческого тестирования.

Идентификация стадии цикла эструса у мышей

Мониторинг цикла эструса и классификация стадий проводились с использованием вагинальной цитологии, описанной ранее (McLean et al., 2012). Стадии эстрального цикла определяли на основании наблюдения за лейкоцитами, ороговевшими эпителиальными клетками и ядросодержащими эпителиальными клетками (рис. 1A–D, Byers et al., 2012). Мышей промывали ежедневно в течение 2 недель перед тестированием, чтобы убедиться, что временная шкала цикла течки была нормальной для каждой мыши. Цикл эструса длился 2–8 дней, при этом наиболее частой продолжительностью цикла было 4 дня (рис. 1Е).Лаваж у каждого животного затем брали сразу после каждого поведенческого теста. Введение лаважа после тестирования сводит к минимуму риск дополнительного стресса, который может повлиять на поведенческие показатели животного (Ekambaram et al., 2017). Мышам была назначена стадия цикла течки на основе цитологической оценки, а затем делегирована в экспериментальную группу [сексуально-восприимчивые (эструс и метеструс) и нерецептивные (NR; диэструс и проэструс)] для каждого поведенческого теста (McLean et al., 2012). ).

Поведенческое тестирование

Все тесты, выбранные для исследования (за исключением теста с вращающимся стержнем, который проводился в течение 2 дней), были тестами, для завершения которых не требовалось несколько дней, поскольку стадия эстрального цикла может меняться от 1 дня к следующему. В общей сложности 41 мышь-самка и 18 мышей-самцов подверглись серии тестов, выполненных в определенном порядке (рис. 1F). Некоторые поведенческие тесты не требовали использования всех 41 самок мышей, поскольку результаты этих тестов показали минимальную изменчивость в тестируемых когортах.Таким образом, не все самки прошли все поведенческие тесты. Все мыши прошли один и тот же порядок тестирования, но некоторые из них пропускали определенное поведение или заканчивали более ранний поведенческий тест. Поскольку стадия эстрального цикла определялась сразу после каждого теста, все тесты проводились вслепую. Порядок тестирования не был рандомизирован по полу, чтобы предотвратить перекрестное загрязнение феромонами. Однако тестирование было рандомизировано для стадии эстрального цикла, поскольку не все мыши находились на одной и той же стадии в любой момент времени.Это также объясняло разное количество самок, использованных для каждого теста, поскольку самок можно было непропорционально отнести к одной группе по сравнению с другой. Поэтому для некоторых тестов требовалось дополнительное количество самок мышей, чтобы сбалансировать две экспериментальные группы самок. Сначала были протестированы поведенческие задачи, связанные с тревогой, чтобы избежать влияния обработки на поведенческие результаты мышей (рис. 1F).

Беспокойство

Приподнятый крестообразный лабиринт (EPM) и тестирование доски с отверстиями использовались для измерения тревожности у мышей.Эти тесты исследуют исследовательское поведение мышей в незнакомой обстановке, имитируя то, что считается тревожным поведением у людей (Lezak et al., 2017). EPM предполагает размещение мыши на арене с двумя закрытыми и двумя открытыми рукавами (длиной 35 см), приподнятыми на 50 см над полом на 5 минут. В конце каждого испытания лабиринт очищали клидоксом, чтобы устранить запах предыдущей подопытной мыши. Исследовательское поведение регистрировали и измеряли с помощью программного обеспечения Ethovision XT, v11.5 (Noldus, Нидерланды). Процент времени, проведенного в распростертых объятиях, является показателем беспокойства (рис. 2А).

Рисунок 2 . Эстральный цикл не влияет на тревожность. Аппарат для приподнятого крестообразного лабиринта. Мышь тратит 5 минут на изучение двух открытых рукавов без стен и двух закрытых рукавов, окруженных стенками. Чем больше времени мы провели в открытых рукавах, тем меньше беспокойства и стресса проявляет мышь (A) . Устройство для перфорированной доски. Мышь проводит 15 минут, исследуя квадратную арену с исследовательскими отверстиями для тыкания носом. Чем больше общее время, пройденное расстояние и количество входов в центр (обведено красной рамкой), тем меньше беспокойства мыши.Более простые движения, вставание и количество тычков указывают на большее исследовательское поведение (B) . Достоверной разницы между женской и мужской группами в проценте (%) времени, проведенном в распростертых объятиях (C) , не было. нс > 0,05.

Испытание доски с отверстиями состояло из квадратной арены (45 × 45 см) с девятью отверстиями в полу (рис. 2В). Два слоя инфракрасных лучей сформировали сетку по всей арене для измерения горизонтальной и вертикальной активности, а дополнительные инфракрасные лучи, расположенные в отверстиях в полу, фиксируют, когда мышь сует нос в отверстие.Тестирование длилось 15 минут, при этом записывались различные параметры для оценки исследовательского поведения (дополнительная таблица S1). Арена очищалась Clidox между каждой мышью.

Обучение и память

Распознавание новых объектов (NOR) считается краткосрочным тестом для измерения рабочей памяти, не зависящей от гиппокампа (Cohen and Stackman, 2015). Мышей подвергали воздействию двух одинаковых белых пластиковых цилиндров на арене размером 40 × 40 см до тех пор, пока они не исследовали оба объекта в течение 20 с.После 10-минутной задержки мышей возвращали на арену, где один из предметов был заменен цилиндром из синего стекла. Время взаимодействия со знакомыми и новыми объектами было записано (рис. 3А). Мышей исключали из тестирования с новым объектом, если они не достигали критерия 20-секундного времени исследования с идентичными объектами в течение 5 минут (Leger et al. , 2013). Все поведение записывалось с помощью Ethovision XT, v.11.5. Арена очищалась Clidox между каждой мышью.

Рисунок 3 . Эстральный цикл не влияет на кратковременную память и моторное обучение. Временная шкала и аппарат для нового объекта. Сначала мышь привыкает к двум идентичным объектам (испытание заканчивается через 20 с, потраченных на взаимодействие с обоими объектами). Через 10 минут мышь снова помещают на арену нового объекта на 5 минут с новым объектом и одним из двух объектов, к которым она привыкла (A) . Хронология и устройство для задачи обучения двигателю с вращающимся ротором.Сначала мышь привыкает ходить по вращающейся балке в течение 5 мин. Через 24 часа мышь подвергается пяти последовательным испытаниям, и время, проведенное на платформе до падения, регистрируется для каждого испытания (B) . И женские группы, и мужчины отдавали предпочтение новому объекту знакомому объекту (C) . В задаче с вращающимся стержнем все группы проводили больше времени на вращающемся стержне от одного испытания к другому, как и ожидалось для мышей C57, и не продемонстрировали существенных различий между собой по времени, проведенному на вращающемся стержне в каждом испытании (D) . **<0,005.

Моторное обучение измеряли с помощью вращающегося теста (Shiotsuki et al., 2010). В первый день мышей обучали бегать на вращающейся балке [четыре оборота в минуту (об/мин)] в течение 5 мин. После 24-часовой задержки мышей помещали на движущуюся балку по мере того, как она ускорялась на 1 об/мин в секунду с начальной скорости 4 об/мин. Тестирование повторяли пять раз (интервал между испытаниями 3 минуты), и задержку падения луча регистрировали для каждого из пяти испытаний, а среднее значение пяти испытаний принимали за значение производительности (рис. 3B).Оборудование очищали с помощью Clidox после каждой тестируемой мыши.

Общительность

Общительность была измерена с использованием 3-камерного задания социального подхода (рис. 4А). Экспериментальный протокол был адаптирован из Yang et al. (2011). Мышей приучали в течение 5 мин к арене размером 60 × 40 см, разделенной на три камеры двумя панелями. В левой и правой камерах в каждом углу была пустая клетка. Затем мышей возвращали в среднюю камеру и блокировали доступ из левой и правой камеры, в то время как новую мышь случайным образом помещали в клетку с левой или правой камерой.Новая мышь была того же пола, возраста (P60–90) и штамма и не была братом и сестрой тестируемой мыши. После введения новой мыши подопытной мыши давали исследовать все три камеры в течение 10 минут. Арена очищалась с помощью Clidox между тестированием каждой мыши для устранения мочи и любого запаха от предыдущего теста и новой мыши. Для изучения влияния удаления запахов и тактильных сигналов на СИ был разработан визуальный протокол СИ, который немного отличался от трехкамерного социального подхода. Это было сделано путем помещения новых мышей в закрытую клетку, а не в клетку с решетками, которая использовалась для начальной задачи с тремя камерами.Повторный тест трехкамерного социального подхода проводился не менее чем через 2 недели после первого трехкамерного социального подхода или не менее чем через 1 неделю после завершения визуального социального подхода (рис. 1F). Поведение регистрировали с помощью видеокамеры и отслеживали с помощью программного обеспечения Ethovision XT, v11.5 (Noldus, Нидерланды).

Рисунок 4 . Влияние цикла эструса на социальное поведение самок мышей C57BL/6J. Аппарат для 3-х камерного социального взаимодействия (СИ). Клетки для СИ традиционно имеют решетку (А) .В задаче SI самки и самцы NR демонстрируют значительное предпочтение новой однополой мыши клетке без мыши. Сексуально восприимчивые (SR) самки не отдают предпочтения новой мышиной клетке или клетке без мыши (B) . В визуальной задаче SI, где клетки закрыты, а не заперты, самки SR по-прежнему демонстрируют отсутствие предпочтения новой мыши по сравнению с клеткой без мыши (C) . Десять самок мышей повторно протестировали во второй раз в SI, чтобы сравнить время взаимодействия, когда NR противСР. Двусторонний ANOVA с повторными измерениями был использован с постфактум критерием Бонферрони для сравнения времени взаимодействия с новой мышью по сравнению с отсутствием мыши для каждой группы (D) . Тест привыкания/отторжения от обоняния использовали для определения различий в обнаружении запаха между самками NR и SR. Мышь подвергается воздействию ватных палочек с запахом в привычной клетке. Самки SR и NR не демонстрируют существенной разницы в обнаружении запаха дистиллированной воды (H ₂ O), миндального экстракта и запаха новой, незнакомой однополой мыши (E) .**<0,005, ****<0,0001, нс > 0,05.

Различение запахов было протестировано с помощью теста привыкания/отторжения от обоняния (рис. 4E; Yang and Crawley, 2009). Мышь помещают в пустую домашнюю клетку с чистой деревянной подстилкой и дают ей акклиматизироваться в течение 30 мин. Затем мыши предъявляют запах на ватной палочке в течение 2 минут с последующим 1-минутным интервалом между испытаниями. Каждый тип запаха присутствует три раза подряд, прежде чем появляется следующий тип запаха. Типы запахов были представлены в следующем порядке: дистиллированная вода (H ₂ O), миндальный экстракт в разведении 1:100 и незнакомая однополая мышь. Запах от незнакомой мыши был получен путем протирания подстилки клетки незнакомой мыши ватной палочкой. Поведение регистрировалось с помощью видеокамеры, а секундомер использовался для отслеживания количества времени, которое мышь провела, вдыхая запах.

Статистика

Статистический анализ выполнен с использованием GraphPad Prism (Prism 7). Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего (SEM). Чтобы изучить существенные различия между средними значениями, для повторного SI был использован двухфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) с повторными измерениями (RM).Однофакторный дисперсионный анализ использовался для EPM и доски с отверстиями, а однофакторный с RM для вращающегося стержня. Для 3-х камерного социального подхода и ЯОР использовались парные студенческие t -тесты. Post hoc тесты включали Бонферрони в повторные SI. Критерий множественных сравнений Тьюки использовался после всех однофакторных дисперсионных анализов.

Результаты

Учитывая, что некоторые поведенческие феномены могут различаться между полами и циклом течки у самок, мы стремились исследовать вклад стадии цикла эструса в поведенческие изменения у мышей. Мы протестировали самок мышей в цикле эструса и самцов мышей в различных поведенческих задачах, которые измеряют тревожность, обучаемость, память и общительность.

Цикл эструса у грызунов

Мы охарактеризовали стадию цикла эструса у самок мышей, собирая вагинальные образцы сразу после каждой поведенческой задачи и исследуя их цитологию под микроскопом. Каждую стадию характеризовали на основе доли лейкоцитов, ороговевших эпителиальных клеток и ядерных эпителиальных клеток (рис. 1A-D).На стадии проэструса в цикле эструса преобладают ядросодержащие эпителиальные клетки, тогда как на стадии эструса ороговевшие эпителиальные клетки в большом количестве. Стадия метэструса представляет собой смесь всех трех типов клеток, но в основном состоит из ороговевших эпителиальных клеток. На стадии диэструса также наблюдается смесь всех типов клеток с наибольшей долей лейкоцитов. Развитие цикла предполагает, что лейкоциты агрегируют во время диэструса и исчезают с началом проэструса. Во время проэструса появляются ядросодержащие эпителиальные клетки, которые заменяются ороговевшими эпителиальными клетками, когда мыши вступают в стадию эструса. К метэструсу начинается инвазия лейкоцитов, которая продолжается до диэструса (McLean et al., 2012). Мыши, у которых было обнаружено, что они находятся в проэструсе и течке, были помещены в одну группу, а мыши в диэструсе и метэструсе были объединены в другую группу для целей анализа, поскольку первая группа считается восприимчивой к самцам, а вторые — нет.

Беспокойство

Сначала мы проверили половые различия, связанные с тревожностью, поскольку влияние цикла эструса на тревожность остается неубедительным в литературе.Кроме того, поведенческие задачи, связанные с тревогой, чувствительны к обработке и, следовательно, должны выполняться перед другими тестами. Самцов и самок мышей тестировали с помощью EPM в качестве теста на тревожность (Rodgers and Johnson, 1995; Lezak et al., 2017). Не было существенной разницы в процентах времени, проведенного в открытых рукавах между сексуально восприимчивыми самками, самками NR и самцами ( F _(2,44) = 0,5130, p = 0,4888; рис. 2C). Кроме того, мы протестировали мышей на доске с отверстиями, поведенческой задаче, измеряющей несколько видов поведения, включая тревогу и исследовательскую активность.В доске с отверстиями не было существенной разницы по всем параметрам ( p > 0,05), за исключением количества уколов в центральной зоне. Выявлена ​​достоверная разница в количестве уколов в центр арены ( F _(2,52) = 4,771, p = 0,0125) и апостериорных тестов показали, что количество уколов в центр арены центральная зона различалась между самцами и сексуально восприимчивыми самками, а также между самцами и самками NR (дополнительная таблица S1).В целом, результаты не показывают различий в тревожности самок на разных стадиях эстрального цикла и в зависимости от пола.

Обучение и память

Учитывая, что эстроген может модулировать кратковременную память и обучение посредством активации рецепторов эстрогена, мы попытались выяснить, проявляют ли самки различия в обучении и памяти в течение эстрального цикла (Liu et al. , 2008; Frick, 2009; Han et al., 2008). и др., 2013; Бин и др., 2015). Мышей тестировали в задаче NOR на кратковременную негиппокампальную память и в задаче с вращающимся стержнем на моторное обучение.Различий между самцами и самками по ЯОР не было ( F _(2,106) = 0,2567, p = 0,7742). Достоверная разница между временем, проведенным с новым объектом, и временем, проведенным с знакомым объектом, была обнаружена для каждой группы: сексуально восприимчивые самки ( t ₍₁₇₎ = 3,3, p < 0,005), NR самки ( t ₍₁₃₎ = 5,74, p < 0,005) и самцы ( t ₍₁₇₎ = 3,72, p < 0.005; Рисунок 3С).

Что касается двигательного обучения, то в испытаниях на сексуально восприимчивых самках ( F _{(2,827,36,75)} = 6,934, p = 0,001), NR-самках ( F _{, (3,449) 48,29)} = 6,959, р = 0,0003) и для самцов ( F _{(2,784,47,32)} = 5,806, р = 0,0023; рис. 3Г).

Социальное взаимодействие

Наконец, мы протестировали мышей на половые различия в SI.Цикл эструса хорошо зарекомендовал себя в модуляции сексуального поведения и может влиять на то, как мышь приближается к новой мыши того же или другого пола (Kim et al., 2016). Мы использовали задачу социального подхода с 3 камерами, чтобы определить общительность наших подопытных мышей с новой однополой мышью. Мы обнаружили, что самки NR выполняли это задание аналогично самцам, показывая большее время взаимодействия с новой мышью по сравнению с пустой клеткой (самки NR: t ₍₂₀₎ = 5,123, p <0.0001, самцы: т ₍₁₇₎ = 6,575, р < 0,0001). Напротив, сексуально восприимчивые самки не показали разницы во времени взаимодействия между новой мышью и пустой клеткой ( t ₍₁₄₎ = 1,475, p = 0,1624; рисунок 4B). Обнаружив эту разницу, мы сначала проверили, была ли разница в предпочтении новой мыши связана с различиями в обонятельном восприятии между сексуально восприимчивыми и NR самками. Это было сделано с помощью задачи обонятельного привыкания/различения, где мы обнаружили, что как сексуально восприимчивые, так и NR-самки одинаково реагировали на представление различных запахов ( p > 0.05 за каждый запах; Рисунок 4Е). Затем мы проверили эффект удаления запаха и тактильных сигналов, поместив новую мышь под клетку из прозрачного твердого акрила (по сравнению со стандартной клеткой из акриловых стержней). Время взаимодействия с новой мышью по сравнению с пустой клеткой существенно не отличалось ( t ₍₁₁₎ = 2,028, p = 0,0675) у сексуально восприимчивых самок, когда предъявлялся только визуальный сигнал новой мыши. и обонятельные, и тактильные сигналы новой мыши были устранены.Самки NR продолжали демонстрировать значительное предпочтение новой мыши пустой клетке при отсутствии тактильных и запаховых сигналов ( t ₍₁₆₎ = 5,364, p <0,0001; рисунок 4C). Эти данные предполагают, что разница в SI между сексуально восприимчивыми и NR самками не зависит от запаха или тактильных сигналов от новой мыши, а скорее от визуальных сигналов. Наконец, мы подтвердили, что эта разница в производительности SI присутствует у отдельных мышей, когда они переключаются между этапами.Мышей тестировали дважды, в частности, во время НР и сексуально-рецептивной стадии, и каждый раз с отдельной новой мышью. Здесь наблюдается значительное предпочтение новой мыши по сравнению с клеткой без мыши, когда самки были NR и когда они были сексуально восприимчивыми ( F _(1,18) = 9,731, p = 0,0059). Однако апостериорное тестирование показало значительный эффект восприимчивости, так что самки NR больше взаимодействовали с новой мышью, чем когда они были сексуально восприимчивы (SR; p = 0.0026; Рисунок 4D). Эти результаты приводят к выводу, что существует разница в социальных предпочтениях самок в отношении новых однополых мышей в течение цикла эструса. Кроме того, это различие может быть связано с визуальными сигналами новой мыши и не зависит от запаха и тактильных сигналов.

Обсуждение

Наш основной вывод заключается в том, что сексуально восприимчивые самки мышей не демонстрируют статистически значимого предпочтения новой мыши по сравнению с пустым вольером. Это прямо контрастирует с самками и самцами NR, которые вместо этого проводят больше времени, исследуя новую мышь.Эти результаты не были связаны с различиями в обонятельном восприятии, потому что и восприимчивые, и NR-мыши одинаково выполняли задачу обонятельного различения/привыкания (рис. 4E). Не было никаких различий между любой из экспериментальных групп в отношении поведенческих характеристик в любом из других проанализированных нами тестов, что свидетельствует об отсутствии различий в тревожности, кратковременной негиппокампальной рабочей памяти и моторном обучении.

Тревога часто сопутствует половым различиям у людей и связана с ними.Женщины в два раза чаще испытывают тревожные симптомы, чем мужчины (Nolen-Hoeksema, 2001; Bekker and van Mens-Verhulst, 2007). Воспроизводимость этой ошибки у грызунов остается спорной, прежде всего потому, что тревожно-подобные симптомы, дифференцированные по полу, не могут быть воспроизведены на животных моделях (Lezak et al., 2017). Имеются отчеты, описывающие эксперименты, в которых оценивались половые предубеждения моделей грызунов в контексте тревожного поведения. Однако противоречивые выводы о предвзятости по признаку пола в этих экспериментах затруднили предположение о том, демонстрируют ли грызуны половые различия в отношении такого поведения (Donner and Lowry, 2013; Mehta et al., 2013; Кокрас и др., 2015). Цикл также может влиять на чувствительность к лекарствам. Действительно, Picard et al., 2019 недавно показали, что самки C57Bl6/J в эструсе не реагируют на низкие дозы кетамина, в то время как самки NR реагируют и демонстрируют реакцию, сравнимую с самцами.

Наши результаты отличаются от результатов предыдущих исследований тревожности, которые могли быть подвержены влиянию лаважей на стресс самок грызунов (Gouveia et al., 2004; D’Souza and Sadananda, 2017). Подобно нашим выводам, Meziane et al.(2007) и Bath et al. (2012) не обнаружили различий между стадиями эстрального цикла мышей C57 в EPM и поведенческих характеристиках в открытом поле, когда лаважи были взяты в течение 10 минут после окончания тестирования. Эти результаты совпадают с результатами, представленными здесь, и предполагают, что самки грызунов не проявляют специфических различий в тревожности в течение эстрального цикла и по сравнению с самцами. Наше исследование доски с отверстиями действительно выявило значительные различия между полами в отношении тычков в центральной зоне. Однако остальные параметры, измеренные для доски с отверстиями, существенно не изменились, что позволяет предположить, что сексуальная восприимчивость не оказывает сильного влияния на исследовательский драйв.

Не было обнаружено заметного влияния эстрального цикла на кратковременную рабочую память у мышей. Поскольку исследования обнаружили критическое окно для модуляции кратковременной памяти в связи с активацией рецептора эстрогена, цикл течки может не влиять на поведение на более поздних стадиях жизни грызунов, включая P60–90, когда мы тестировали наших мышей (Bean et al., 2015). ). Возможно, уровни эстрогена во время эстрального цикла недостаточно высоки, чтобы активировать эстрогеновые рецепторы в переднем мозге. Предыдущие исследования, в которых экзогенно применяли эстроген для лечения снижения когнитивных функций, проводили это лечение либо на овариэктомированных, либо на старых мышах. Повышенные уровни после экзогенного лечения могут превышать базовые уровни эстрогена на типичных стадиях эстрального цикла, но не измерялись ни в одном из описанных исследований (Liu et al., 2008; Frick, 2009; Han et al., 2013; Bean et al. ., 2015). Как правило, уровни эстрогена в фазах низкой восприимчивости (диэструс и метэструс) ниже, чем в фазах высокой восприимчивости (эструс и проэструс), но не устраняются (McLean et al., 2012). Поэтому было бы интересно количественно оценить активацию рецепторов эстрогена с помощью базальных уровней эстрогена для каждой стадии цикла по сравнению с активацией при лечении эстрогенами.В совокупности это новые подходы, которые мы можем использовать для определения степени гормональных изменений в цикле течки в кратковременной негиппокампальной памяти.

Результаты исследования с вращающимся стержнем согласуются с предыдущими исследованиями моторного обучения, в которых поведенческие характеристики не зависели от разных стадий эстрального цикла и пола (Meziane et al. , 2007). Основываясь на этих результатах, гормональные колебания во время эструса недостаточно сильны, чтобы повлиять на двигательное обучение. Экзогенное введение гормонов может инициировать активацию обучения двигательным задачам, но здоровые самки не демонстрируют различий в моторном обучении по сравнению с самцами на разных стадиях эстрального цикла (Morgan and Pfaff, 2001; Ogawa et al., 2003). Поскольку локомоция в задаче с дыркой не отличалась между сексуально восприимчивыми и NR женщинами и мужчинами, результаты ротарода зависели от двигательного обучения, а не от двигательной активности (дополнительная таблица S1).

Как правило, исследования социального поведения грызунов были сосредоточены на влиянии гормонов вазопрессина и окситоцина. Однако важно учитывать различия в социальном поведении, связанные с гормональными колебаниями, происходящими на протяжении всего цикла течки, из-за их влияния на сексуальное поведение.Поведение самцов мышей C57Bl6/J при восхождении на самок значительно выше, когда самки находятся в эструсе, чем в диэструсе, что свидетельствует о том, что сексуальная восприимчивость совпадает с поведением при спаривании (Powers, 1970; Kim et al. , 2016). Ограниченное количество исследований показало влияние цикла течки на социальное поведение. Одно из таких исследований было сосредоточено на аспекте социального обучения, когда мышь отдает предпочтение еде, которая ранее была обнаружена по дыханию сородича (Ervin et al., 2015). Во время сексуально-восприимчивой, проэструсной стадии эстрального цикла самка мыши отдает предпочтение пище, которую она узнает от своего сородича, в большей степени, чем мышь в диэструсе NR (Choleris et al., 2011). Для наших экспериментов мы хотели отделить влияние цикла течки на память от общительности. Однако для будущих экспериментов было бы интересно рассмотреть влияние на социальную память, например, в 3-камерной задаче социального распознавания (Yang et al., 2011). Если сексуально восприимчивые самки по-прежнему способны различать знакомых и новых мышей в этой задаче, но проявляют пониженную общительность, то это согласуется с нашими результатами по обучению, памяти и общительности.

Мы предполагаем, что мышь SR с меньшей вероятностью будет взаимодействовать с новой однополой мышью, учитывая, что мышь настроена на размножение и будет активно искать сексуального партнера (Kim et al. , 2016). Это не относится к мышам NR, возможно, потому, что их мотивация к социальной новизне перевешивает их мотивацию к поиску партнера. Недавнее исследование показало, что повышенный уровень эстрогена может воздействовать на соматосенсорную кору, повышая возбудимость парвальбуминовых (PV) вставочных интернейронов (Clemens et al., 2019). Эта роль эстрогена потенциально может распространяться на другие области коры, такие как первичная зрительная кора. Поэтому мы также предполагаем, что цикл эструса может влиять на зрительную корковую активность во время SI, так что профиль гормонов во время сексуальной восприимчивости регулирует возбуждение нейронов PV.

Чувствительность социального поведения к эстральному циклу может иметь значение при нарушениях развития нервной системы и нервно-психических заболеваниях. Традиционно трехкамерный социальный подход использовался для выявления дефицита общительности в мышиных моделях аутизма, включая синдром ломкой Х-хромосомы, синдром Ретта и делецию 16p11. 2 (Moretti and Zoghbi, 2006; Dahlhaus, 2018; Stoppel et al., 2018). Самок мышей обычно исключают из социальных поведенческих задач, но тестирование самок на этих моделях может пролить свет на половой диморфизм общительности при расстройствах аутистического спектра (РАС; Silverman et al., 2010). Дефицит SI между полами также был продемонстрирован в контексте аутизма, но сексуальная восприимчивость может быть фактором, который по-разному регулирует общительность и в дальнейшем делает необходимым мониторинг эстрального цикла мыши (Jeon et al., 2018). Цикл эструса следует рассматривать в будущих экспериментах на моделях мышей с аутизмом.

Учитывая зависящие от штамма эффекты цикла эструса, обнаруженные Meziane et al. (2007) в их исследовании мы признаем, что использование одной линии мышей (C57BL/6J) представляет собой важное ограничение наших результатов.Кроме того, классификация мышей как SR в проэструсе и течке и NR в метэструсе и диэструсе ограничивает детализацию нашего анализа, особенно в отношении наших результатов в отношении SI. Будущая работа может устранить эти ограничения при изучении поведенческих воздействий отдельных гормонов, которые колеблются в течение цикла эструса.

В то время как самки животных остаются недостаточно представленными в биомедицинских исследованиях из-за беспокойства об изменчивости, вызванной эстральным циклом, литература, исследующая связь между циклами женских гормонов и изменчивостью во многих областях, остается скудной.Описанные здесь исследования с использованием мышей C57BL/6J предполагают, что гормональный цикл может быть ответственным за различия в SI в тесте 3-камерного социального подхода, но основной механизм требует дальнейшего изучения. В этих экспериментах мы изучили только один общий штамм мышей, и расширение диапазона штаммов было бы поучительным. Обширная литература по изменчивости цикла эструса у разных видов и между штаммами может стать мощным инструментом для исследователей. Такая литература позволила бы исследователям учитывать потенциальную изменчивость, вызванную циклом течки, и позволила бы более полно реализовать Закон о возрождении NIH.

Заявление о доступности данных

Необработанные данные, подтверждающие выводы этой статьи, будут предоставлены авторами без неоправданных оговорок.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Бостонской детской больницы.

Вклад авторов

TC и SG провели все поведенческие эксперименты и вагинальную цитологию. NA помогала с некоторыми поведенческими экспериментами.ТС проанализировал большую часть данных и написал статью. SG предоставил дополнительный текст и анализ статьи. NA и MF предоставили дополнительные тексты к статье и исправления. TC, SG, NA и MF участвовали в написании. TC и SG провели сбор экспериментальных данных. NA и MF придумали первоначальную идею.

Финансирование

Работа, о которой сообщается, была выполнена в Центре нейроразвития поведения, Бостонская детская больница, США, и поддержана грантом IDDRC (1U54HD0

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Натали Пикард из лаборатории Fagiolini (Бостонская детская больница, США) за то, что она помогла нам оценить эстральный цикл у мышей.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fnbeh.2020.00113/full#supplementary-material.

Ссылки

Bath, K.G., Chuang, J., Spencer-Segal, J.L., Amso, D., Altemus, M., McEwen, B.S., et al. (2012). Полиморфизм вариантного мозгового нейротрофического фактора (валин-66-метионин) способствует специфическому для стадии развития и эстральной стадии выражению тревожно-подобного поведения у самок мышей. биол. Психиатрия 72, 499–504. doi: 10. 1016/j.biopsych.2012.03.032

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Бин, Л.A., Kumar, A., Rani, A., Guidi, M., Rosario, A.M., Cruz, P.E., et al. (2015). Повторное открытие критического окна для терапии эстрогенами. J. Neurosci. 35, 16077–16093. doi: 10.1523/jneurosci.1890-15.2015

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Беккер, Дж. Б., Прендергаст, Б. Дж., и Лян, Дж. В. (2016). Самки крыс не более изменчивы, чем крысы-самцы: метаанализ исследований в области неврологии. биол. Секс отличается. 7:34. doi: 10.1186/s13293-016-0087-5

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Беккер, М.Х. и ван Менс-Ферхульст, Дж. (2007). Тревожные расстройства: половые различия в распространенности, степени и фоне, но гендерно-нейтральное лечение. Род. Мед. 4, С178–С193. doi: 10.1016/s1550-8579(07)80057-x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Холерис, Э. , Клиппертон-Аллен, А.Е., Грей, Д.Г., Диас-Гонсалес, С., и Уэлсман, Р.Г. (2011). Дифференциальные эффекты антагонистов дофаминовых рецепторов D1-типа и D2-типа и фазы эстрального цикла на социальное обучение пищевым предпочтениям, кормлению и социальным взаимодействиям у мышей. Нейропсихофармакология 36, 1689–1702. doi: 10.1038/npp.2011.50

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Клеменс, А. М., Леншоу, К., Бид, П., Ланьсян, Л., Саммонс, Р., Науманн, Р. К., и соавт. (2019). Эструс-циклическая регуляция коркового торможения. Курс. биол. 29, 605.e6–615.e6. doi: 10.1016/j.cub.2019.01.045

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Коэн, С.Дж., и Стэкман, Р.В.младший (2015). Оценка участия гиппокампа грызунов в задаче распознавания новых объектов. Обзор. Поведение. Мозг Res. 285, 105–117. doi: 10.1016/j.bbr.2014.08.002

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Д’Суза, Д. , и Садананда, М. (2017). Зависимые от фазы эстрального цикла изменения тревожных и депрессивных профилей у крыс Вистар-Киото позднего подросткового возраста. Энн. Неврологи. 24, 136–145. дои: 10.1159/000477151

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Экамбарам, Г., Кумар, С.К.С., и Джозеф, Л.Д. (2017). Сравнительное исследование по оценке эстрального цикла у мышей методом визуального и вагинального лаважа. Дж. Клин. Диагн. Рез. 11, AC05–AC07. doi: 10.7860/jcdr/2017/23977.9148

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Эрвин, К.С.Дж., Лаймер, Дж.М., Матта, Р., Клиппертон-Аллен, А.Е., Кавальерс, М., и Чолерис, Э. (2015). Участие эстрогенов в социальном поведении грызунов: быстрое и долгосрочное действие. Горм.Поведение 74, 53–76. doi: 10.1016/j.yhbeh.2015.05.023

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фрик, К. М. (2009). Эстрогены и возрастное ухудшение памяти у грызунов: чему мы научились и куда двигаться дальше? Горм. Поведение 55, 2–23. doi: 10.1016/j.yhbeh.2008.08.015

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Гувейя, А. Мл., Дос Сантос, У. Д., Фелисбино, Ф. Э., де Афонсека, Т. Л., Антунес, Г.и Морато, С. (2004). Влияние поведения эстрального цикла на поведение крыс в приподнятом Т-образном лабиринте. Поведение. Процессы 67, 167–171. doi: 10.1016/j.beproc.2004.03.018

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хан, X., Энлле, К.К., Бин, Л.А., Рани, А., Семпл-Роуленд, С.Л., Кумар, А., и соавт. (2013). Роль эстрогеновых рецепторов α и β в сохранении функции гиппокампа при старении. J. Neurosci. 33, 2671–2683.doi: 10.1523/JNEUROSCI.4937-12.2013

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чон, С.Дж., Гонсалес, Э.Л., Мабунга, Д.Ф.Н., Валенсия, С. Т., Ким, Д.Г., Ким, Ю., и др. (2018). Половые поведенческие особенности моделей грызунов с расстройством аутистического спектра. Эксп. Нейробиол. 27, 321–343. doi: 10.5607/en.2018.27.5.321

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Килкенни, К., Браун, В.Дж., Катхилл, И.К., Эмерсон, М., и Альтман, Д.Г. (2010). Улучшение отчетности об исследованиях в области биологических наук: руководство ARRIVE по отчетности об исследованиях на животных. PLoS Биол. 8:e1000412. doi: 10.1371/journal.pbio.1000412

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ким, Х., Сон, Дж., Ю, Х., Ким, Х., О, Дж., Хан, Д., и другие. (2016). Влияние эстрального цикла самок на половое поведение и ультразвуковую вокализацию самцов мышей C57BL/6 и аутичных мышей BTBR T+ tf/J. Эксп.Нейробиол. 25, 156–162. doi: 10.5607/en.2016.25.4.156

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Кокрас, Н. , Антониу, К., Михаил, Х.Г., Кафецопулос, В., Пападопулу-Дайфоти, З., и Далла, К. (2015). Тест принудительного плавания: как насчет женщин? Нейрофармакология 99, 408–421. doi: 10.1016/j.neuropharm.2015.03.016

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Леже, М., Кьедевиль, А., Буэ, В., Хэлевин, Б., Boulouard, M., Schumann-Bard, M., et al. (2013). Тест распознавания объектов на мышах. Нац. протокол 8, 2531–2537. doi: 10.1038/nprot.2013.155

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лезак К.Р., Пропавший без вести Г. и Карлесон В.А. мл. (2017). Поведенческие методы изучения тревожности у грызунов. Диалоги Клин. Неврологи. 19, 181–191.

Реферат PubMed | Академия Google

Лю, Ф., Дэй, М., Муньис, Л. К., Битран, Д., Ариас Р., Ревилла-Санчес Р. и соавт. (2008). Активация рецептора эстрогена-β регулирует синаптическую пластичность гиппокампа и улучшает память. Нац. Неврологи. 11, 334–343. дои: 10.1038/nn2057

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Маклин, А.С., Валенсуэла, Н., Фай, С., и Беннетт, С.А. (2012). Проведение вагинального лаважа, окрашивание кристаллическим фиолетовым и вагинальная цитологическая оценка для определения стадии эстрального цикла у мышей. Дж.Вис. Эксп. 67:e4389. дои: 10.3791/4389

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мехта, Н. С., Ван, Л., и Редей, Э. Э. (2013). Половые различия в депрессивном, тревожном поведении и уровнях транскриптов гиппокампа в генетической модели крыс. Гены Поведение мозга. 12, 695–704. doi: 10.1111/gbb.12063

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мезиан Х., Куагаззал А. М., Обер Л., Витжих М. и Крезель В.(2007). Влияние эстрального цикла на поведение самок мышей C57BL/6J и BALB/cByJ: последствия для стратегий фенотипирования. Гены Поведение мозга. 6, 192–200. doi: 10.1111/j.1601-183x.2006.00249.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Нолен-Хоксема, С. (2001). Гендерные различия в депрессии. Курс. Реж. Психол. науч. 10, 173–176. дои: 10.1111/1467-8721.00142

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Огава, С., Чан, Дж., Густафссон, Дж., Корах, К.С., и Пфафф, Д.В. (2003). Эстроген увеличивает двигательную активность у мышей через рецептор эстрогена а: специфичность для типа активности. Эндокринология 144, 230–239. doi: 10.1210/en.2002-220519

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Пикард, Н., Такесян, А.Е., Фаджолини, М., и Хенш, Т.К. (2019). Рецепторы NMDA 2A в парвальбуминовых клетках опосредуют специфичную для пола быструю реакцию кетамина на корковую активность. мол. Психиатрия 24, 828–838. doi: 10.1038/s41380-018-0341-9

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Прендергаст, Б. Дж., Ониши, К.Г., и Цукер, И. (2014). Самки мышей освобождены для участия в нейробиологических и биомедицинских исследованиях. Неврологи. Биоповедение. Ред. 40, 1–5. doi: 10.1016/j.neubiorev.2014.01.001

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Роджерс, Р. Дж., и Джонсон, Н. Дж. Т. (1995).Факторный анализ пространственно-временных и этологических показателей в мышином тесте на тревожность в приподнятом крестообразном лабиринте. Фармакол. Биохим. Поведение 52, 297–303. дои: 10.1016/0091-3057(95)00138-м

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Сиоцуки Х., Йошими К., Симо Ю., Фунаяма М., Такамацу Ю., Икеда К. и др. (2010). Вращающийся тест для оценки обучения двигательным навыкам. J. Neurosci. Методы 189, 180–185. doi: 10.1016/j.jneumeth.2010.03.026

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Stoppel, L.J., Kazdoba, T.M., Schaffler, M. D., Preza, A.R., Heynen, A., Crawley, J.N., et al. (2018). R-баклофен устраняет когнитивный дефицит и улучшает социальные взаимодействия у двух линий мышей с делецией 16p11.2. Нейропсихофармакология 43, 513–524. doi: 10.1038/npp.2017.236

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ян, М., Сильверман, Дж. Л.и Кроули, Дж. Н. (2011). Автоматизированная трехкамерная задача социального подхода для мышей. Курс. протокол Неврологи. Глава 8: Модуль 8.26. дои: 10.1002/0471142301.ns0826s56

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Стадия цикла эструса имеет решающее значение для интерпретации поведения самки мыши при социальном взаимодействии

Принадлежности Расширять

принадлежность

• ¹ Поведенческий центр нейроразвития, Бостонская детская больница, Бостон, Массачусетс, США.

Элемент в буфере обмена

Тришала Чари и соавт. Фронт Behav Neurosci. 2020 .

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

принадлежность

• ¹ Поведенческий центр нейроразвития, Бостонская детская больница, Бостон, Массачусетс, США.

Элемент в буфере обмена

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

Абстрактный

Самки животных в биомедицинских исследованиях традиционно исключались из научных исследований из-за предполагаемой дополнительной сложности, вызванной циклом течки.Однако, учитывая важность половых различий при различных неврологических расстройствах, тестирование самок мышей имеет решающее значение для выявления связанных с полом эффектов при заболеваниях. Чтобы определить восприимчивость простого поведения к гормональным колебаниям в цикле эструса, мы изучили влияние пола и цикла эструса на различные поведенческие задачи, обычно используемые в лабораториях фенотипирования мышей. Самцов и самок мышей C57BL/6J тестировали в небольшой группе тестов короткой продолжительности, и сразу после завершения каждого теста самок классифицировали с помощью цитологического исследования вагинального лаважа как сексуально восприимчивых (проэструс и эструс) или невосприимчивых (NR; метэструс и диэструс).Мы показали, что существует значительная разница в 3-камерном социальном взаимодействии (SI) между самками мышей на разных стадиях их эстрального цикла, при этом сексуально восприимчивые мыши не проявляют особого интереса к новой самке мыши по сравнению с пустой камерой. Самки мышей NR демонстрировали такой же уровень предпочтения новых самок мышей, как и самцы мышей в отношении новых самцов мышей. Не было обнаружено различий между полами или внутри полов в тестах на тревогу в приподнятом крестообразном лабиринте (EPM; доска с отверстиями), рабочей памяти [распознавание новых объектов (NOR)] и моторном обучении (повторные тесты на вращающемся стержне).Мы пришли к выводу, что стадия цикла эструса может влиять на SI между однополыми сородичами и не влияет на производительность в приподнятом крестообразном лабиринте, доске с отверстиями, NOR и вращающемся стержне.

Ключевые слова: беспокойство; эстральный цикл; обучение и память; половые различия; социальное поведение.

Авторское право © 2020 Chari, Griswold, Andrews and Fagiolini.

Цифры

Хронология течки мышей…

Хронология цикла эструса мыши.Цикл эструса у мышей длится от 2 до 8…

Хронология цикла эструса мыши. Цикл течки у мышей длится 2–8 дней, как показано на гистограмме, представляющей продолжительность цикла течки для n = 41 самок мышей (E) , и представлен четырьмя отдельными стадиями: проэструс (A) , течка (B) , диэструс (C) и метэструс (D) .Каждую стадию цикла различают с помощью вагинальной цитологии и идентификации определенных типов клеток (лейкоциты — желтая стрелка, ядросодержащие эпителиальные клетки — голубая стрелка, ороговевшие эпителиальные клетки — белая стрелка). Мыши в проэструсе и течке сексуально восприимчивы (SR), а мыши в диэструсе и метэструсе невосприимчивы (NR). (F) Временная шкала поведенческого тестирования показывает порядок выполнения поведенческих задач. Сначала выполнялись поведенческие задачи, связанные с тревогой (красные), чтобы предотвратить какое-либо влияние обработки на поведенческие результаты.Затем последовали тесты на обучение и память (синие), а затем тесты, связанные с общительностью (зеленые). Серые стрелки указывают на то, что последующее поведенческое задание было выполнено по крайней мере через 24 часа или неделю спустя. Черные стрелки означают, что следующее задание было выполнено по крайней мере через одну-две недели. Синяя стрелка указывает на то, что тестирование с вращающимся стержнем проводилось через 24 часа после тренировки с вращающимся стержнем.

Тревога не зависит от…

Эстральный цикл не влияет на тревожность.Аппарат для приподнятого крестообразного лабиринта.…

Эстральный цикл не влияет на тревожность. Аппарат для приподнятого крестообразного лабиринта. Мышь тратит 5 минут на изучение двух открытых рукавов без стен и двух закрытых рукавов, окруженных стенками. Чем больше времени мы провели в открытых рукавах, тем меньше беспокойства и стресса проявляет мышь (A) . Устройство для перфорированной доски. Мышь проводит 15 минут, исследуя квадратную арену с исследовательскими отверстиями для тыкания носом.Чем больше общее время, пройденное расстояние и количество входов в центр (обведено красной рамкой), тем меньше беспокойства мыши. Более простые движения, вставание и количество тычков указывают на большее исследовательское поведение (B) . Между женской и мужской группами не было существенной разницы в процентах (%) времени, проведенного в распростертых объятиях (C) . нс > 0,05.

Кратковременная память и моторное обучение…

Эстральный цикл не влияет на кратковременную память и моторное обучение. Хронология…

Эстральный цикл не влияет на кратковременную память и моторное обучение. Временная шкала и аппарат для нового объекта. Сначала мышь привыкает к двум идентичным объектам (испытание заканчивается через 20 с, потраченных на взаимодействие с обоими объектами). Через 10 минут мышь снова помещают на арену с новым объектом на 5 минут с новым объектом и одним из двух объектов, к которым она привыкла (A) .Хронология и устройство для задачи обучения двигателю с вращающимся ротором. Сначала мышь привыкает ходить по вращающейся балке в течение 5 мин. Через 24 часа мышь подвергается пяти последовательным испытаниям, и время, проведенное на платформе до падения, регистрируется для каждого испытания (B) . И женские группы, и мужчины отдавали предпочтение новому объекту знакомому объекту (C) . В задаче с вращающимся стержнем все группы проводили больше времени на вращающемся стержне от одного испытания к другому, как и ожидалось для мышей C57, и не продемонстрировали существенных различий между собой по времени, проведенному на вращающемся стержне в каждом испытании (D) . **<0,005.

Влияние цикла эструса на…

Влияние эстрального цикла на социальное поведение самок мышей C57BL/6J. Аппарат…

Влияние эстрального цикла на социальное поведение самок мышей C57BL/6J.Аппарат для 3-х камерного социального взаимодействия (СИ). Клетки для SI традиционно имеют решетку (A) . В задаче SI самки и самцы NR демонстрируют значительное предпочтение новой однополой мыши клетке без мыши. Сексуально восприимчивые (SR) самки не отдают предпочтения новой мышиной клетке или клетке без мыши (B) . В визуальной задаче SI, где клетки закрыты, а не заперты, самки SR по-прежнему демонстрируют отсутствие предпочтения новой мыши по сравнению с клеткой без мыши (C) .Десять самок мышей повторно протестировали во второй раз в SI, чтобы сравнить время взаимодействия, когда NR против SR. Двусторонний ANOVA с повторными измерениями был использован с постфактум критерием Бонферрони для сравнения времени взаимодействия с новой мышью по сравнению с отсутствием мыши для каждой группы (D) . Тест привыкания/отторжения от обоняния использовали для определения различий в обнаружении запаха между самками NR и SR. Мышь подвергается воздействию ватных палочек с запахом в привычной клетке. Самки SR и NR не демонстрируют существенной разницы в обнаружении запаха дистиллированной воды (H ₂ O), экстракта миндаля и запаха новой, незнакомой однополой мыши (E) .**<0,005, ****<0,0001, нс > 0,05.

Похожие статьи

• Обучение и память нарушаются в задаче распознавания объектов во время метэструса/диэструса и после депривации сна.

  Кордейра Дж., Коллуру С.С., Розенблатт Х., Край Дж., Стрекер Р.Е., Маккарли Р.В. Кордейра Дж. и др. Поведение мозга Res.2018 26 февраля; 339: 124-129. doi: 10.1016/j.bbr.2017.11.033. Epub 2017 24 ноября. Поведение мозга Res. 2018. PMID: 2

  34 Бесплатная статья ЧВК.

• Влияние цикла течки и циталопрама на тревожное поведение и экспрессию c-fos у крыс.

  Саин А., Дериноз О., Юксель Н., Шахин С., Болай Х. Саин А. и др. Фармакол Биохим Поведение. 2014 Сентябрь; 124: 180-7.doi: 10.1016/j.pbb.2014.06.002. Epub 2014 13 июня. Фармакол Биохим Поведение. 2014. PMID: 24933337

• Эстральный цикл влияет на реакцию самок крыс в тесте приподнятого крестообразного лабиринта.

  Маркондес Ф. К., Мигель К.Дж., Мело Л.Л., Спадари-Братфиш Р.К. Маркондес Ф.К. и др. Физиол Поведение. 2001 ноябрь-декабрь; 74 (4-5): 435-40. doi: 10.1016/s0031-9384(01)00593-5. Физиол Поведение.2001. PMID: 117

• Женский пол предохраняет от повреждения легких после травматического геморрагического шока.

  Карузо Дж. М., Сюй Д. З., Лу К., Даял С. Д., Дейч Э. А. Карузо Дж. М. и соавт. Surg Infect (лиственница). Осень 2001 г .; 2 (3): 231–40. дои: 10.1089/109629601317202713. Surg Infect (лиственница). 2001. PMID: 12593713

• Суицидальная идея.

  Хармер Б., Ли С., Дуонг ТВХ, Саадабади А. Хармер Б. и др. 2021 г., 6 августа. В: StatPearls [Интернет]. Остров сокровищ (Флорида): StatPearls Publishing; 2022 янв.–. 2021 г., 6 августа. В: StatPearls [Интернет]. Остров сокровищ (Флорида): StatPearls Publishing; 2022 янв.–. PMID: 33351435 Бесплатные книги и документы.

Цитируется

• Добавление фолиевой кислоты во время беременности изменяет поведение потомства самцов крыс: нитративный стресс и нейровоспалительные последствия.

  Сильвейра Х.С., Рамирес Жуниор О.В., Шмитц Ф., Феррейра Ф.С., Родригес Ф.К., Сильва Р.С., Савио ЛеБ, Вайс АТС. Сильвейра Дж.С. и др. Мол Нейробиол. 2022 г., 19 января. doi: 10.1007/s12035-022-02724-7. Онлайн перед печатью. Мол Нейробиол. 2022. PMID: 35044624

• Влияние эстрального цикла на поведение самок в тестах тревожности у грызунов.

  Ловик Т.А., Зангросси Х. мл.Ловик Т.А. и соавт. Фронтовая психиатрия. 2021 31 авг;12:711065. doi: 10.3389/fpsyt.2021.711065. Электронная коллекция 2021. Фронтовая психиатрия. 2021. PMID: 34531768 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Психометрические показатели функционального теста на бревне у мышей C57BL/6.

  Orenduff MC, Rezeli ET, Hursting SD, Pieper CF. Orenduff MC, et al. Комп Мед. 2021 1 августа; 71 (4): 302-308.doi: 10.30802/AALAS-CM-21-000033. Epub 2021 26 июля. Комп Мед. 2021. PMID: 34311810 Бесплатная статья ЧВК.

• Введение окситоцина новорожденным формирует схемы гиппокампа и восстанавливает социальное поведение в мышиной модели аутизма.

  Бертони А., Шаллер Ф., Тицио Р. , Гайяр С., Сантини Ф., Солин М., Диабира Д., Вайдьянатан Р., Матараццо В., Медина И., Гамак Э., Чжан Дж., Чини Б., Гайарса Дж. Л., Мускателли Ф.Бертони А. и др. Мол Психиатрия. 2021 г., 21 июля. doi: 10.1038/s41380-021-01227-6. Онлайн перед печатью. Мол Психиатрия. 2021. PMID: 342

• Дефицит параоксоназы 2 у мышей изменяет двигательное поведение и вызывает специфические для региона изменения транскриптов в головном мозге.

  Гаррик Дж. М., Коул Т. Б., Баммлер Т. К., Макдональд Дж. В., Марсиллах Дж., Ферлонг К. Э., Коста Л. Г. Гаррик Дж. М. и соавт.Нейротоксикол Тератол. 2021 сен-октябрь;87:107010. doi: 10.1016/j.ntt.2021.107010. Epub 2021 1 июля. Нейротоксикол Тератол. 2021. PMID: 34216730

использованная литература

1. 1. Bath K. G., Chuang J., Spencer-Segal J.L., Amso D., Altemus M., McEwen B.S., et al. . (2012). Полиморфизм вариантного мозгового нейротрофического фактора (валин-66-метионин) способствует специфическому для стадии развития и эстральной стадии выражению тревожно-подобного поведения у самок мышей.биол. Психиатрия 72, 499–504. 10.1016/ж.биопсих.2012.03.032 — DOI — ЧВК — пабмед
2. 1. Бин Л.А., Кумар А., Рани А., Гуиди М., Росарио А.М., Круз П. Е. и др. . (2015). Повторное открытие критического окна для терапии эстрогенами. Дж. Нейроски. 35, 16077–16093. 10.1523/jneurosci.1890-15.2015 — DOI — ЧВК — пабмед
3. 1. Беккер Дж.Б., Прендергаст Б.Дж., Лян Дж.В. (2016). Самки крыс не более изменчивы, чем крысы-самцы: метаанализ исследований в области неврологии. биол. Секс отличается. 7:34. 10.1186/с13293-016-0087-5 — DOI — ЧВК — пабмед
4. 1. Бири А. К., Цукер И. (2011). Половая предвзятость в неврологии и биомедицинских исследованиях. Неврологи. Биоповедение. Откр. 35, 565–572. 10.1016/ж.неубиорев.2010.07.002 — DOI — ЧВК — пабмед
5. 1. Беккер М.Х., ван Менс-Ферхульст Дж. (2007). Тревожные расстройства: половые различия в распространенности, степени и фоне, но гендерно-нейтральное лечение. Генд. Мед. 4, С178–С193. 10.1016/с1550-8579(07)80057-х — DOI — пабмед

Показать все 41 ссылка

Что касается двигательного обучения, то в испытаниях на сексуально восприимчивых самках наблюдалась значительная разница ( F _{(2,827,36,75)} = 6,934, p = 0,001), NR самок ( F 95 ,48,29) = 6,959, p = 0,0003) и для мужчин ( F _{(2,784,47,32)} = 5,806, p = 0,0023; ).

Социальное взаимодействие

Наконец, мы протестировали мышей на половые различия в СИ. Цикл эструса хорошо зарекомендовал себя в модулировании полового поведения и может влиять на то, как мышь приближается к новой мыши того же или другого возраста.разного пола (Kim et al., 2016). Мы использовали задачу социального подхода с 3 камерами, чтобы определить общительность наших подопытных мышей с новой однополой мышью. Мы обнаружили, что самки NR выполняли это задание аналогично самцам, показывая большее время взаимодействия с новой мышью по сравнению с пустой клеткой (самки NR: t ₍₂₀₎ = 5,123, p <0,0001, самцы: ). t ₍₁₇₎ = 6,575, p < 0,0001). Напротив, сексуально восприимчивые самки не показали разницы во времени взаимодействия между новой мышью и пустой клеткой ( t ₍₁₄₎ = 1.475, р = 0,1624; ). Обнаружив эту разницу, мы сначала проверили, была ли разница в предпочтении новой мыши связана с различиями в обонятельном восприятии между сексуально восприимчивыми и NR самками. Это было сделано с помощью задачи обонятельного привыкания/различения, где мы обнаружили, что как сексуально восприимчивые, так и NR-самки одинаково реагировали на представление различных запахов (90 665 p 90 666 > 0,05 на каждый запах; ). Затем мы проверили эффект удаления запаха и тактильных сигналов, поместив новую мышь под клетку из прозрачного твердого акрила (по сравнению со стандартной клеткой из акриловых стержней).Время взаимодействия с новой мышью по сравнению с пустой клеткой существенно не отличалось ( t ₍₁₁₎ = 2,028, p = 0,0675) у сексуально восприимчивых самок, когда предъявлялся только визуальный сигнал новой мыши. и обонятельные, и тактильные сигналы новой мыши были устранены. Самки NR продолжали демонстрировать значительное предпочтение новой мыши пустой клетке при отсутствии тактильных и запаховых сигналов ( t ₍₁₆₎ = 5,364, p < 0.0001; ). Эти данные предполагают, что разница в SI между сексуально восприимчивыми и NR самками не зависит от запаха или тактильных сигналов от новой мыши, а скорее от визуальных сигналов. Наконец, мы подтвердили, что эта разница в производительности SI присутствует у отдельных мышей, когда они переключаются между этапами. Мышей тестировали дважды, в частности, во время НР и сексуально-рецептивной стадии, и каждый раз с отдельной новой мышью. Здесь наблюдается значительное предпочтение новой мыши клетке без мыши, когда самки были NR и когда они были сексуально восприимчивыми ( F _(1,18) = 9.731, р = 0,0059). Однако апостериорное тестирование показало значительный эффект восприимчивости, так что самки NR больше взаимодействовали с новой мышью, чем когда они были сексуально восприимчивы (SR; p = 0,0026; ). Эти результаты приводят к выводу, что существует разница в социальных предпочтениях самок в отношении новых однополых мышей в течение цикла эструса. Кроме того, это различие может быть связано с визуальными сигналами новой мыши и не зависит от запаха и тактильных сигналов.

Обсуждение

Наш основной вывод заключается в том, что сексуально восприимчивые самки мышей не демонстрируют статистически значимого предпочтения новой мыши по сравнению с пустым вольером. Это прямо контрастирует с самками и самцами NR, которые вместо этого проводят больше времени, исследуя новую мышь. Эти результаты не были связаны с различиями в обонятельном восприятии, потому что и восприимчивые, и NR-мыши одинаково выполняли задание на обонятельное различение/привыкание (10). Не было никаких различий между любой из экспериментальных групп в отношении поведенческих характеристик в любом из других проанализированных нами тестов, что свидетельствует об отсутствии различий в тревожности, кратковременной негиппокампальной рабочей памяти и моторном обучении.

Тревога часто сопутствует половым различиям у людей и связана с ними. Женщины в два раза чаще испытывают тревожные симптомы, чем мужчины (Nolen-Hoeksema, 2001; Bekker and van Mens-Verhulst, 2007). Воспроизводимость этой ошибки у грызунов остается спорной, прежде всего потому, что тревожно-подобные симптомы, дифференцированные по полу, не могут быть воспроизведены на животных моделях (Lezak et al., 2017). Имеются отчеты, описывающие эксперименты, в которых оценивались половые предубеждения моделей грызунов в контексте тревожного поведения.Однако противоречивые выводы о предвзятости по признаку пола в этих экспериментах затруднили предположение о том, демонстрируют ли грызуны половые различия в отношении такого поведения (Donner and Lowry, 2013; Mehta et al., 2013; Kokras et al., 2015). Цикл также может влиять на чувствительность к лекарствам. Действительно, Picard et al., 2019 недавно показали, что самки C57Bl6/J в эструсе не реагируют на низкие дозы кетамина, в то время как самки NR реагируют и демонстрируют реакцию, сравнимую с самцами.

Наши результаты отличаются от предыдущих исследований тревожности, которые, возможно, были подвержены влиянию лаважей на стресс самок грызунов (Gouveia et al., 2004; Д’Суза и Садананда, 2017 г.). Подобно нашим выводам, Meziane et al. (2007) и Bath et al. (2012) не обнаружили различий между стадиями эстрального цикла мышей C57 в EPM и поведенческих характеристиках в открытом поле, когда лаважи были взяты в течение 10 минут после окончания тестирования. Эти результаты совпадают с результатами, представленными здесь, и предполагают, что самки грызунов не проявляют специфических различий в тревожности в течение эстрального цикла и по сравнению с самцами. Наше исследование доски с отверстиями действительно выявило значительные различия между полами в отношении тычков в центральной зоне.Однако остальные параметры, измеренные для доски с отверстиями, существенно не изменились, что позволяет предположить, что сексуальная восприимчивость не оказывает сильного влияния на исследовательский драйв.

Не выявлено заметного влияния эстрального цикла на кратковременную рабочую память у мышей. Поскольку исследования обнаружили критическое окно для модуляции кратковременной памяти в связи с активацией рецепторов эстрогена, цикл эструса может не влиять на поведение на более поздних стадиях жизни грызунов, включая P60–90, когда мы тестировали наших мышей (Bean et al., 2015). Возможно, уровни эстрогена во время эстрального цикла недостаточно высоки, чтобы активировать эстрогеновые рецепторы в переднем мозге. Предыдущие исследования, в которых экзогенно применяли эстроген для лечения снижения когнитивных функций, проводили это лечение либо на овариэктомированных, либо на старых мышах. Повышенные уровни после экзогенного лечения могут превышать базовые уровни эстрогена на типичных стадиях эстрального цикла, но не измерялись ни в одном из описанных исследований (Liu et al., 2008; Frick, 2009; Han et al., 2013; Bean et al. ., 2015). Как правило, уровни эстрогена в фазах низкой восприимчивости (диэструс и метэструс) ниже, чем в фазах высокой восприимчивости (эструс и проэструс), но не устраняются (McLean et al. , 2012). Поэтому было бы интересно количественно оценить активацию рецепторов эстрогена с помощью базальных уровней эстрогена для каждой стадии цикла по сравнению с активацией при лечении эстрогенами. В совокупности это новые подходы, которые мы можем использовать для определения степени гормональных изменений в цикле течки в кратковременной негиппокампальной памяти.

Результаты исследования с вращающимся стержнем согласуются с предыдущими исследованиями двигательного обучения, в которых поведенческие характеристики не зависели от разных стадий цикла эструса и пола (Meziane et al., 2007). Основываясь на этих результатах, гормональные колебания во время эструса недостаточно сильны, чтобы повлиять на двигательное обучение. Экзогенное введение гормонов может инициировать активацию обучения двигательным задачам, но здоровые самки не демонстрируют различий в моторном обучении по сравнению с самцами на разных стадиях эстрального цикла (Morgan and Pfaff, 2001; Ogawa et al., 2003). Поскольку локомоция в задаче с дыркой не отличалась между сексуально восприимчивыми и NR женщинами и мужчинами, результаты ротарода зависели от двигательного обучения, а не от двигательной активности (дополнительная таблица S1).

Как правило, исследования социального поведения грызунов были сосредоточены на влиянии гормонов вазопрессина и окситоцина. Однако важно учитывать различия в социальном поведении, связанные с гормональными колебаниями, происходящими на протяжении всего цикла течки, из-за их влияния на сексуальное поведение.Поведение самцов мышей C57Bl6/J при восхождении на самок значительно выше, когда самки находятся в эструсе, чем в диэструсе, что свидетельствует о том, что сексуальная восприимчивость совпадает с поведением при спаривании (Powers, 1970; Kim et al., 2016). Ограниченное количество исследований показало влияние цикла течки на социальное поведение. Одно из таких исследований было сосредоточено на аспекте социального обучения, когда мышь отдает предпочтение еде, которая ранее была обнаружена по дыханию сородича (Ervin et al., 2015). Во время сексуально-восприимчивой, проэструсной стадии эстрального цикла самка мыши отдает предпочтение пище, которую она узнает от своего сородича, в большей степени, чем мышь в диэструсе NR (Choleris et al. , 2011). Для наших экспериментов мы хотели отделить влияние цикла течки на память от общительности. Однако для будущих экспериментов было бы интересно рассмотреть влияние на социальную память, например, в 3-камерной задаче социального распознавания (Yang et al., 2011). Если сексуально восприимчивые самки по-прежнему способны различать знакомых и новых мышей в этой задаче, но проявляют пониженную общительность, то это согласуется с нашими результатами по обучению, памяти и общительности.

Мы предполагаем, что мышь SR с меньшей вероятностью будет взаимодействовать с новой однополой мышью, учитывая, что мышь настроена на размножение и будет активно искать сексуального партнера (Kim et al., 2016). Это не относится к мышам NR, возможно, потому, что их мотивация к социальной новизне перевешивает их мотивацию к поиску партнера. Недавнее исследование показало, что повышенный уровень эстрогена может воздействовать на соматосенсорную кору, повышая возбудимость парвальбуминовых (PV) вставочных интернейронов (Clemens et al. , 2019). Эта роль эстрогена потенциально может распространяться на другие области коры, такие как первичная зрительная кора. Поэтому мы также предполагаем, что цикл эструса может влиять на зрительную корковую активность во время SI, так что профиль гормонов во время сексуальной восприимчивости регулирует возбуждение нейронов PV.

Чувствительность социального поведения к эстральному циклу может иметь значение при нарушениях развития нервной системы и нервно-психических заболеваниях. Традиционно трехкамерный социальный подход использовался для выявления дефицита общительности в мышиных моделях аутизма, включая синдром ломкой Х-хромосомы, синдром Ретта и делецию 16p11.2 (Moretti and Zoghbi, 2006; Dahlhaus, 2018; Stoppel et al., 2018). Самок мышей обычно исключают из социальных поведенческих задач, но тестирование самок на этих моделях может пролить свет на половой диморфизм общительности при расстройствах аутистического спектра (РАС; Silverman et al., 2010). Дефицит SI между полами также был продемонстрирован в контексте аутизма, но сексуальная восприимчивость может быть фактором, который по-разному регулирует общительность и в дальнейшем делает необходимым мониторинг эстрального цикла мыши (Jeon et al. , 2018). Цикл эструса следует рассматривать в будущих экспериментах на моделях мышей с аутизмом.

Учитывая зависящие от штамма эффекты цикла эструса, обнаруженные Meziane et al. (2007) в их исследовании мы признаем, что использование одной линии мышей (C57BL/6J) представляет собой важное ограничение наших результатов.Кроме того, классификация мышей как SR в проэструсе и течке и NR в метэструсе и диэструсе ограничивает детализацию нашего анализа, особенно в отношении наших результатов в отношении SI. Будущая работа может устранить эти ограничения при изучении поведенческих воздействий отдельных гормонов, которые колеблются в течение цикла эструса.

В то время как самки животных остаются недостаточно представленными в биомедицинских исследованиях из-за изменчивости, вызванной циклом течки, литература, исследующая связь между циклами женских гормонов и изменчивостью во многих областях, остается скудной.Описанные здесь исследования с использованием мышей C57BL/6J предполагают, что гормональный цикл может быть ответственным за различия в SI в тесте 3-камерного социального подхода, но основной механизм требует дальнейшего изучения. В этих экспериментах мы изучили только один общий штамм мышей, и расширение диапазона штаммов было бы поучительным. Обширная литература по изменчивости цикла эструса у разных видов и между штаммами может стать мощным инструментом для исследователей. Такая литература позволила бы исследователям учитывать потенциальную изменчивость, вызванную циклом течки, и позволила бы более полно реализовать Закон о возрождении NIH.

Заявление о доступности данных

Необработанные данные, подтверждающие выводы этой статьи, будут предоставлены авторами без неоправданных оговорок.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Бостонской детской больницы.

Вклад авторов

TC и SG провели все поведенческие эксперименты и вагинальную цитологию. NA помогала с некоторыми поведенческими экспериментами.ТС проанализировал большую часть данных и написал статью. SG предоставил дополнительный текст и анализ статьи. NA и MF предоставили дополнительные тексты к статье и исправления. TC, SG, NA и MF участвовали в написании. TC и SG провели сбор экспериментальных данных. NA и MF придумали первоначальную идею.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Натали Пикард из лаборатории Fagiolini (Бостонская детская больница, США) за то, что она помогла нам оценить эстральный цикл у мышей.

Сноски

Финансирование. Работа, о которой сообщается, была выполнена в Центре нейроразвития поведения, Бостонская детская больница, США, и поддержана грантом IDDRC (1U54HD0

Ссылки

• Bath K.G., Chuang J., Spencer-Segal J.L., Amso D., Altemus M., McEwen B.S., et al. . (2012). Полиморфизм вариантного мозгового нейротрофического фактора (валин-66-метионин) способствует специфическому для стадии развития и эстральной стадии выражению тревожно-подобного поведения у самок мышей. биол. Психиатрия 72, 499–504. 10.1016/j.biopsych.2012.03.032 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Бин Л. А., Кумар А., Рани А., Гуиди М., Росарио А. М., Круз П. Э. и др. . (2015). Повторное открытие критического окна для терапии эстрогенами. Дж. Нейроски.35, 16077–16093. 10.1523/jneurosci.1890-15.2015 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Беккер Дж. Б., Прендергаст Б. Дж., Лян Дж. В. (2016). Самки крыс не более изменчивы, чем крысы-самцы: метаанализ исследований в области неврологии. биол. Секс отличается. 7:34. 10.1186/s13293-016-0087-5 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Бири А.К., Цукер И. (2011). Половая предвзятость в неврологии и биомедицинских исследованиях. Неврологи. Биоповедение. преп. 35, 565–572. 10.1016/j.neubiorev.2010.07.002 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Bekker M.H., van Mens-Verhulst J. (2007). Тревожные расстройства: половые различия в распространенности, степени и фоне, но гендерно-нейтральное лечение. Генд. Мед. 4, С178–С193. 10.1016/s1550-8579(07)80057-x [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Байерс С. Л., Уайлс М. В., Данн С. Л., Тафт Р. А. (2012). Инструмент идентификации эстрального цикла мыши и изображения. PLoS один 7:e35538. 10.1371/journal.pone.0035538 ​​[бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Холерис Э., Клиппертон-Аллен А.Э., Грей Д.Г., Диас-Гонсалес С., Уэлсман Р.Г. (2011). Дифференциальные эффекты антагонистов дофаминовых рецепторов D1-типа и D2-типа и фазы эстрального цикла на социальное обучение пищевым предпочтениям, кормлению и социальным взаимодействиям у мышей. нейропсихофармакология 36, 1689–1702 гг. 10.1038/npp.2011.50 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Clemens A.M., Lenschow C., Beed P., Lanxiang L., Sammons R., Naumann R.K., et al. . (2019). Эструс-циклическая регуляция коркового торможения.Курс. биол. 29, 605.e6–615.e6. 10.1016/j.cub.2019.01.045 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Cohen SJ, Stackman R. W., Jr. (2015). Оценка участия гиппокампа грызунов в задаче распознавания новых объектов. Обзор. Поведение Мозг Res. 285, 105–117. 10.1016/j.bbr.2014.08.002 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Dahlhaus R. (2018). О мышах и людях: моделирование синдрома ломкой Х-хромосомы. Фронт. Мол. Неврологи. 11:41. 10.3389/fnmol.2018.00041 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Donner N.C., Лоури CA (2013). Половые различия в тревожности и эмоциональном поведении. Евро. Дж. Физиол. 465, 601–626. 10.1007/s00424-013-1271-7 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Д’Суза Д., Садананда М. (2017). Зависимые от фазы эстрального цикла изменения тревожных и депрессивных профилей у крыс Вистар-Киото позднего подросткового возраста. Аня. Неврологи. 24, 136–145. 10.1159/000477151 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Экамбарам Г., Кумар С.К.С., Джозеф Л.Д. (2017). Сравнительное исследование по оценке эстрального цикла у мышей методом визуального и вагинального лаважа. Дж. Клин. Диагн. Рез. 11, АС05–АС07. 10.7860/jcdr/2017/23977.9148 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Ervin KSJ, Lymer JM, Matta R., Clipperton-Allen A.E., Kavaliers M., Choleris E. (2015). Участие эстрогенов в социальном поведении грызунов: быстрое и долгосрочное действие. Горм. Поведение 74, 53–76. 10.1016/j.yhbeh.2015.05.023 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Фрик К.М. (2009). Эстрогены и возрастное ухудшение памяти у грызунов: чему мы научились и куда двигаться дальше? Горм. Поведение 55, 2–23. 10.1016/j.yhbeh.2008.08.015 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Гувейя А., младший, Дос Сантос У.Д., Фелисбино Ф.Е., де Афонсека Т.Л., Антунес Г., Морато С. (2004). Влияние поведения эстрального цикла на поведение крыс в приподнятом Т-образном лабиринте. Поведение Процессы 67, 167–171. 10.1016/j.beproc.2004.03.018 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Хан Х., Aenlle K.K., Bean L.A., Rani A., Semple-Rowland S. L., Kumar A., ​​et al. . (2013). Роль эстрогеновых рецепторов α и β в сохранении функции гиппокампа при старении. Дж. Нейроски. 33, 2671–2683. 10.1523/JNEUROSCI.4937-12.2013 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Jeon S.J., Gonzales E.L., Mabunga D.F.N., Valencia S.T., Kim D.G., Kim Y., et al. . (2018). Половые поведенческие особенности моделей грызунов с расстройством аутистического спектра. Эксп. Нейробиол. 27, 321–343.10.5607/en.2018.27.5.321 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Kilkenny C., Browne WJ, Cuthill I.C., Emerson M., Altman D.G. (2010). Улучшение отчетности об исследованиях в области биологических наук: руководство ARRIVE по отчетности об исследованиях на животных. PLoS биол. 8:e1000412. 10.1371/journal.pbio.1000412 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Ким Х., Сон Дж., Ю Х., Ким Х., О Дж., Хан Д. и др. . . (2016). Влияние эстрального цикла самок на половое поведение и ультразвуковую вокализацию самцов C57BL/6 и аутичных мышей BTBR T ⁺ tf/J. Эксп. Нейробиол. 25, 156–162. 10.5607/en.2016.25.4.156 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Кокрас Н., Антониу К., Михаил Х.Г., Кафетзопулос В., Пападопулу-Дайфоти З., Далла К. (2015 ). Тест принудительного плавания: как насчет женщин? нейрофармакология 99, 408–421. 10.1016/j.neuropharm.2015.03.016 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Leger M., Quiedeville A., Bouet V., Haelewyn B., Boulouard M., Schumann-Bard M., et al. . (2013). Тест распознавания объектов на мышах.Нац. протокол 8, 2531–2537. 10.1038/nprot.2013.155 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Lezak K.R., Missing G., Carlezon WA, Jr. (2017). Поведенческие методы изучения тревожности у грызунов. Диалоги клин. Неврологи. 19, 181–191. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Liu F., Day M., Muñiz LC, Bitran D., Arias R., Revilla-Sanchez R., et al. . (2008). Активация рецептора эстрогена-β регулирует синаптическую пластичность гиппокампа и улучшает память. Нац. Неврологи. 11, 334–343.10.1038/nn2057 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• McLean A.C., Valenzuela N., Fai S., Bennett S.A. (2012). Проведение вагинального лаважа, окрашивание кристаллическим фиолетовым и вагинальная цитологическая оценка для определения стадии эстрального цикла у мышей. Дж. Вис. Эксп. 67:e4389. 10.3791/4389 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Мехта Н. С., Ван Л., Редей Э. Э. (2013). Половые различия в депрессивном, тревожном поведении и уровнях транскриптов гиппокампа в генетической модели крыс.Гены Мозг Поведение. 12, 695–704. 10.1111/gbb.12063 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Meziane H., Quagazzal A.M., Aubert L., Wietrzych M., Krezel W. (2007). Влияние эстрального цикла на поведение самок мышей C57BL/6J и BALB/cByJ: последствия для стратегий фенотипирования. Гены Мозг Поведение. 6, 192–200. 10.1111/j.1601-183x.2006.00249.x [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Моретти П., Зогби Х.Ю. (2006). Дисфункция MeCP2 при синдроме Ретта и родственных расстройствах. Курс. мнениеЖене. Дев. 16, 276–281. 10.1016/j.gde.2006.04.009 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Морган М.А., Пфафф Д.В. (2001). Влияние эстрогена на активность и поведение мышей, связанное со страхом. Горм. Поведение 40, 472–482. 10.1006/hbeh.2001.1716 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• National Institutes of Health (2015). Рассмотрение пола как биологической переменной в исследованиях, финансируемых NIH. Доступно в Интернете по адресу: http://grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOT-OD-15-102.html. По состоянию на 7 мая 2020 г.
• Нолен-Хоксема С. (2001). Гендерные различия в депрессии. Курс. Реж. Психол. науч. 10, 173–176. 10.1111/1467-8721.00142 [CrossRef] [Google Scholar]
• Огава С., Чан Дж., Густафссон Дж., Корах К.С., Пфафф Д.В. (2003). Эстроген увеличивает двигательную активность у мышей через рецептор эстрогена а: специфичность для типа активности. Эндокринология 144, 230–239. 10.1210/en.2002-220519 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Пикард Н., Такесян А. Э., Фаджолини М., Хенш Т.К. (2019). Рецепторы NMDA 2A в парвальбуминовых клетках опосредуют специфичную для пола быструю реакцию кетамина на корковую активность. Мол. Психиатрия 24, 828–838. 10.1038/s41380-018-0341-9 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Powers J. P. (1970). Гормональная регуляция половой восприимчивости во время эстрального цикла крысы. Физиол. Поведение 5, 831–835. 10.1016/0031-9384(70)-8 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Прендергаст Б.Дж., Ониши К.Г., Цукер И. (2014). Самки мышей освобождены для участия в нейробиологических и биомедицинских исследованиях.Неврологи. Биоповедение. преп. 40, 1–5. 10.1016/j.neubiorev.2014.01.001 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Роджерс Р. Дж., Джонсон Н. Дж. Т. (1995). Факторный анализ пространственно-временных и этологических показателей в мышином тесте на тревожность в приподнятом крестообразном лабиринте. Фармакол. Биохим. Поведение 52, 297–303. 10.1016/0091-3057(95)00138-m [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Shiotsuki H., Yoshimi K., Shimo Y., Funayama M., Takamatsu Y., Ikeda K., et al. . (2010). Вращающийся тест для оценки обучения двигательным навыкам.Дж. Нейроски. Методы 189, 180–185. 10.1016/j.jneumeth.2010.03.026 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Сильверман Дж. Л., Ян М., Лорд К., Кроули Дж. Н. (2010). Анализы поведенческого фенотипирования для мышиных моделей аутизма. Нац. Преподобный Нейроски. 11, 490–502. 10.1038/nrn2851 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Stoppel L.J., Kazdoba T.M., Schaffler M.D., Preza A.R., Heynen A., Crawley J.N., et al. . (2018). R-баклофен устраняет когнитивный дефицит и улучшает социальные взаимодействия в двух линиях 16p11.2 мыши с делецией. нейропсихофармакология 43, 513–524. 10.1038/npp.2017.236 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Ян М., Кроули Дж. Н. (2009). Простая поведенческая оценка обоняния мыши. Курс. протокол Неврологи. Глава 8: Блок 8.24. 10.1002/0471142301.ns0824s48 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Ян М., Сильверман Дж. Л., Кроули Дж. Н. (2011). Автоматизированная трехкамерная задача социального подхода для мышей. Курс. протокол Неврологи. Глава 8: Блок 8.26. 10.1002/0471142301.ns0826s56 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Воспроизводство у свиней — понимание эстрального цикла для управления стадом

Свинья и поросенок, А.К. Butters-Johnson, Iowa State University

Эстральный цикл — это динамический гормональный цикл, который контролирует размножение у самок млекопитающих в связи с высвобождением яйцеклеток (ооцитов) и подготовкой матки к оплодотворению эмбрионов.

Или, короче, эстральный цикл делает возможным размножение!

Несмотря на то, что успешное свиноводство зависит от доставки свиней на рынок, если племенное стадо не воспроизводится должным образом, то с самого начала на рынке будет меньше свиней. Для максимизации воспроизводства вашего стада может потребоваться устранение неполадок, если вы изо всех сил пытаетесь получить достаточное количество свиноматок или свинок. Существует множество причин, по которым это может произойти, однако базовое понимание того, что происходит во время эстрального цикла, может помочь вам в определении наилучшего времени для осеменения ваших свиноматок и в том, как применять программы синхронизации, если возникнет такая необходимость. Здесь мы рассмотрим этапы эстрального цикла и подчеркнем, как эти изменения могут повлиять на воспроизводство ваших свиноматок.

Хронология

У свиней эстральный цикл обычно занимает 18-21 день, начиная с наблюдения поведенческой течки и заканчивая следующим наблюдением поведенческой течки. Во время этого цикла уровни определенных гормонов будут увеличиваться и уменьшаться, чтобы способствовать росту клеток, развитию органов и сообщать о времени событий развития. Эти гормональные изменения контролируют прохождение эстрального цикла через 4 стадии эстрального цикла.

Изображение выше иллюстрирует движение течки через 4 стадии.Эти 4 стадии эструса сгруппированы в 2 фазы, которые описывают основные модели взаимодействия гормонов и физиологическое состояние яичников.

Фолликулярная фаза

Увеличение секреции эстрогена по мере созревания ооцита и фолликула к овуляции (высвобождению яйцеклетки).

Лютеиновая фаза

Увеличение прогестерона в результате развития желтого тела (обычно называемого «желтым телом»). Фаза физиологических изменений, окружающих определение беременности.

В каждой из этих фаз выделяют стадии, определяемые специфическими гормональными изменениями в пределах фазы морфологии ооцитов и фолликулов Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) секретируется в усиленном режиме в период подготовки к эструсу. Также начинают выделяться небольшие импульсы лютеинизирующего гормона (ЛГ) .

Течка (d от 0 до 1) стадия фолликулярной фазы, когда ооцит достиг зрелости. Пик секреции эстрогена, ФСГ и ЛГ приводит к разрыву фолликула и возникновению овуляции. Овуляция обычно происходит в течение 24–48 часов после пикового выброса эстрогена.

Лютеиновая фаза

Метеструс (d 2–4) Эстроген , ЛГ и ФСГ снизились, и самка больше не сексуально восприимчива к хряку. Фолликулы яичников, высвободившие ооциты во время овуляции, начинают процесс лютеинизации, превращаясь в геморрагическое тело, а затем в желтое тело.С образованием желтого тела (ЖТ, или «желтого тела») начинается секреция прогестерона .

Диэструс (от 5 до 18 дней) является самой продолжительной стадией эстрального цикла, поскольку в этой фазе происходит распознавание беременности. На этом этапе прогестерон продолжает увеличиваться примерно на 12-й день беременности. В это время наличие жизнеспособных эмбрионов позволит сохранить беременность. Если к 15 дню беременности жизнеспособные ооциты не обнаружены, простагландин F2 альфа (PGF2α) будет действовать на CL, вызывая его регрессию и снижение секреции прогестерона .

Отслеживание эстрального цикла лучше всего проводить с помощью календаря. Как и в приведенном ниже примере, после наблюдения за поведенческой течкой вы можете использовать календарь для оценки времени гормональных изменений, связанных с эстральным циклом. Основываясь на стоячей охоте, производители обычно разводят свиноматок с 12-часовыми интервалами, начиная через 12 часов после первой наблюдаемой стоячей охоты. Затем повторить через 24 часа, а иногда и через 36 часов после первой наблюдаемой стоячей течки.

Осведомленность о первом проявлении стоячей охоты и знание продолжительности эстрального цикла является наиболее важным при заказе спермы для спаривания, принимая во внимание применение протоколов эстральной синхронизации или решение проблем размножения в вашем стаде.Применение этих базовых знаний о физиологии свиноматки позволит вам лучше использовать инструменты, доступные для улучшения воспроизводства вашего стада свиноматок.

Ресурсы

Если у вас есть конкретные вопросы или вам нужна помощь в устранении репродуктивных проблем в вашем стаде, обратитесь к этим ресурсам за инструкциями.

Характеристики эстрального цикла крупного рогатого скота

— [Эндрю] Здравствуйте, это Эндрю Сандин, и я хотел бы воспользоваться несколькими краткими моментами, чтобы объяснить некоторые ключевые характеристики эстрального цикла крупного рогатого скота.

Начнем с яичника, очень занятого места у зрелой небеременной телки или коровы.

Два яичника и на них множество фолликулов разного размера и стадии развития.

Два яичника были загружены фолликулами до рождения, и каждый фолликул содержит один ооцит, также известный как яйцеклетка.

Один или несколько из этих фолликулов могут вырасти, чтобы стать заметной структурой на яичнике и секретировать эстроген в кровоток.

Другая видная структура, часто встречающаяся в яичниках, желтое тело или CL, вырабатывает высокие концентрации прогестерона, гормона, который, как известно, поддерживает беременность.

Телки и коровы имеют эстральный цикл, который в среднем составляет 21 день, в течение которого фолликулы растут волнообразно с двумя или тремя волнами роста в течение каждого цикла.

Когорта здоровых фолликулов, обозначенных здесь желтыми кружками, увеличивается в размерах и конкурирует за доминирование до тех пор, пока большинство из них не регрессируют, обозначенные красным цветом.

В среде с высоким уровнем прогестерона, представленной заштрихованной оранжевой кривой, все развитые фолликулы в конечном итоге исчезают, и начинается новая волна.

Однако в конце цикла, когда уровень прогестерона снижается, фолликул может продолжать развиваться до точки овуляции.

К концу течного цикла, примерно на 17-й день, если корова не беременна, простагландин F2 альфа высвобождается из матки и вызывает регресс любого функционального CL в яичниках.

В результате регрессии ХЛ прекращается выработка прогестерона.

В отсутствие высокого прогестерона развивающийся фолликул может продолжать развиваться, что также вызывает повышение концентрации эстрогена и, в конечном итоге, вызывает течку.

Высокий уровень эстрогена в преовуляторном фолликуле вызывает значительные изменения в поведении коров.

Обычно это заметно, когда она становится беспокойной и позволяет другим животным независимо от пола садиться на нее.

Примерно в это же время эстроген также вызывает выброс лютеинизирующего гормона из гипофиза, который оказывает прямое влияние на преовуляторный фолликул и инициирует события, ведущие к овуляции.

Овуляция обычно происходит примерно через день после выброса лютеинизирующего гормона.

Это также происходит через день после начала стоячей течки, нашего лучшего визуального предсказателя того, когда произойдет овуляция.

При овуляции ооцит высвобождается из заполненного жидкостью фолликула в яйцевод, где он может быть оплодотворен.

Тем временем стенка фолликула спадается сама по себе и быстро трансформируется в функциональное желтое тело, вырабатывающее прогестерон.

Итак, вернемся к диаграмме.

Эстральный цикл длится в среднем 21 день, при этом фолликулы развиваются и регрессируют на всем протяжении.

Прогестерон, обозначенный оранжевым цветом, подготавливает матку к беременности и ограничивает развитие фолликулов в яичниках на протяжении большей части цикла.

Но когда CL регрессирует, а уровень прогестерона снижается, это момент, когда фолликул действительно может взлететь, производя все больше и больше эстрогена, представленного коричневой линией, что вызывает течку.

Всплеск лютеинизирующего гормона из гипофиза в конце цикла вызывает овуляцию примерно на день позже.

Если овулировавшая яйцеклетка оплодотворена и наступила беременность, CL не будет регрессировать во время следующего цикла, а выработка прогестерона будет поддерживаться, помогая сохранить беременность.

Эстральные циклы, совокупление и беременность у лисы Фенек (Vulpes Zerda) | Журнал маммологии

Аннотация

Характеристики течки, спаривания и беременности были изучены у содержащихся в неволе лисиц фенек. Монестральные циклы имели средние интервалы 9.9 (±1,2) месяцев, независимо от того, дожили ли детеныши до отъема. Проэструс, судя по набуханию вульвы, начался за 6,5 (±0,7) дней до эструса и не сопровождался кровянистыми выделениями. Процент ороговевших эпителиальных клеток в вагинальных мазках увеличивался во время эструса. В 8 из 10 эстральных периодов во время непрерывного видеомониторинга наблюдалось однократное спаривание с последующим крайне продолжительным копулятивным замком (в среднем 1 ч 58 мин). В двух других циклах копуляция происходила 2 и 3 раза. Паттерны концентраций эстрадиола и прогестерона в фекалиях и сыворотке во время эстральных циклов были аналогичны тем, о которых сообщалось для других псовых.

Монэструсные циклы, редко встречающиеся у млекопитающих, характеризуются одним овуляторным периодом, за которым следует беременность (если происходит оплодотворение) или продолжительной фазой диэструса (если не оплодотворяется), а затем анэструсом (Asa 1996; Conaway 1971). Monestrum чаще всего описывается для видов псовых умеренной зоны, у которых есть только один эстральный период в течение ограниченного сезона размножения. Однако монеструм не определяет количество эстральных периодов в году, а описывает последовательность фаз эстрального цикла, то есть в нефертильном цикле монеструм включает проэструс, эструс, диэструс и анэструс, тогда как полиэструс, напротив, включает проэструс, эструс и диэструс, за которым сразу же следует проэструс без промежуточного периода анэструса. И монеструм, и полиэструм могут быть как сезонными, так и непрерывными.

Сообщается, что все виды псовых, изученные на сегодняшний день, являются чудовищными (Asa 1997, 1998; Asa and Valdespino 1998), и большинство из них имеют только 1 сезонный цикл в году; анэструс составляет оставшуюся часть годового цикла. Однако подавляющее большинство данных относятся к видам умеренной и арктической зон, например, серому волку ( Canis lupus ), койоту ( C. latrans ), рыжей лисице ( Vulpes vulpes ) и песцу ( Vulpes vulpes ) и песцу ( Vulpes vulpes ). Alopex lagopus — обзор см. в Asa and Valdespino, в печати).Мало что известно о псовых тропической зоны, которые без сезонных ограничений, с которыми сталкиваются виды в более высоких широтах, могли бы иметь несезонные чудовищные циклы, как у домашней собаки (средняя продолжительность цикла около 8 месяцев — Кристи и Белл, 1971). На самом деле, южноамериканская крабоедная лисица Cerdocyon тыс. (Brady 1978) и кустарниковая собака Speothos venaticus (Porton et al. 1987) могут иметь 2-й цикл в течение года в неволе с интервалом примерно в 8 месяцев. . Тем не менее, несмотря на их способность снова вступать в течку менее чем за 12 месяцев в неволе, считается, что в дикой природе они размножаются только один раз в год, предположительно там, где они ограничены сезонно меняющимися переменными окружающей среды.

Сообщалось об иной репродуктивной реакции на содержание в неволе лисицы фенек, Vulpes zerda , которая может произвести 2-й помет в случае потери 1-го (Koening 1970). Есть также неподтвержденные сообщения о том, что содержащиеся в неволе фенеки размножаются во второй раз менее чем за год, даже если детеныши выживают. Однако сообщается, что фенек, широко распространенный в песчаных пустынях и полупустынях Северной Африки и северного Синая (Салех и Басуони, 1998 г.), размножается в дикой природе сезонно, а детенышей, выходящих из берлоги, можно увидеть в марте и апреле (Гаутье-Пилтерс, 1967 г. ). ), хотя систематических исследований репродукции ни у фенеков, содержащихся в неволе, ни у фенеков, находящихся на свободном выгуле, не проводилось.

Таким образом, исследование воспроизводства лисицы fennec могло бы предоставить данные в контролируемых условиях. Цели этого исследования состояли в том, чтобы задокументировать: ежегодную частоту эструса; относительная продолжительность проэструсной, эстральной, диэстральной и анэстральной фаз, а также беременности; физиологические корреляты эстрального цикла и беременности. Такие данные позволят установить основные параметры размножения самок тропических псовых и послужат основой для сравнения с псовыми из более высоких широт.

Материалы и методы

Чтобы установить основные параметры воспроизводства самок фенека, мы измерили два основных гормона яичников, эстрадиол и прогестерон. Мы также отслеживали физические и поведенческие характеристики, которые могли быть стимулированы эстрадиолом, такие как отек вульвы, ороговение вагинального эпителия и поведение при спаривании. Считалось, что повышенный уровень прогестерона свидетельствует об овуляции и связан либо с беременностью, либо с лютеиновой фазой у небеременных.

Всего в исследовании приняли участие 6 самок и 5 самцов. Самкам на момент исследования было от 1 до 7 лет (табл. 1). Две самки были пойманы в дикой природе в качестве щенков для торговли домашними животными, но место их поимки неизвестно. Они были конфискованы при въезде в Соединенные Штаты и помещены в зоопарки, как и предки других лисиц, рожденных в неволе.

Лисы содержались в зоопарке Сент-Луиса, Сент-Луис, штат Миссури (38°45′ с.ш., 90°15′ з.д.). Исследование было разделено на 3 этапа, исходя из изменений доступного жилья (рис.1). В период А (январь–август 1996 г.) 4 самки и 3 самца содержались 2 парами и трио (2 самки с 1 самцом). Каждая группа из 2-3 животных содержалась в отдельных помещениях, все с фотопериодом 10L:14D и температурным диапазоном 18-25°C. В одной комнате (в которой содержалось трио) было очень мало окружающего освещения, поэтому на самок 3 и 4, возможно, повлиял более длинный световой день весной и летом.

Рис. 1.

Схема содержания и состава содержащихся в неволе пар и триады лисиц фенека во время исследования.Полосатые горизонтальные линии обозначают негнездящихся самок

Рис. 1.

Схема содержания и состава содержащихся в неволе пар и триады лисиц фенека во время исследования. Полосатые горизонтальные линии указывают на негнездящихся самок

В период В (август 1996 г. – январь 1997 г.) 3 пары содержались в одной комнате, а 4-я пара (самец 2 и самка 2; рис. 1) – в другой, которая соединялась через открытую дверь. 3 пары в большей комнате находились в зрительном, слуховом и обонятельном контакте; 4-я пара была визуально изолирована от них.В период С (февраль 1997 г. – август 1998 г.) 2 из 4 пар (самец и самка 3 и самец и самка 4) были перемещены в отдельную комнату из-за возможной скученности. В течение периода С пары в каждой комнате находились в слуховом и обонятельном, но не визуальном контакте с другой парой. В течение двух лет, включающих периоды B и C, температура колебалась в пределах 15–25°C, а фотопериод составлял 12L:12D.

В ходе исследования изменился состав 3 социальных единиц. Самка 1а, которая была подвергнута эвтаназии через 17 месяцев из-за злокачественной мезотелиомы, не связанной с исследованием, была заменена самкой 1б.Самка 4, 2-я самка в триаде, была помещена вместе с самцом 4 в конце периода А. Однако пара 4 была исключена из исследования через 17 месяцев, поскольку самка не проявляла репродуктивной активности, и была заменена парой 5.

Индивидуальные ограждения размерами 2,5 х 1,25 х 2,00 м, с 3 сплошными деревянными стенами, 1 стеной из проволочной сетки, проволочным верхом и полом, покрытым песком или древесной стружкой. Животных кормили кормом для собак (Laboratory Canine Diet #5006, PMI Nutrition International, Inc., Сент-Луис, Миссури), корм для кошек (ZuPreem Feline Diet, Premium Nutritional Products, Inc., Mission, Kansas; или Nebraska Feline Diet, North Platte, Nebraska), мыши, говяжьи кости, мясной фарш, фрукты и изюм.

Длину и ширину вульвы (края, определяемые границей волосяного покрова) измеряли дважды в неделю штангенциркулем с точностью до 0,5 мм при физическом удержании животного. Клетки вагинального эпителия также собирали в это время с помощью небольшого стерильного ватного тампона, смоченного стерильным физиологическим раствором, и переносили на предметное стекло микроскопа, сушили на воздухе и окрашивали Diff-Quik (American Scientific Products, McGaw Park, Illinois).На предметном стекле подсчитывали сто эпителиальных клеток, которые классифицировали как парабазальные, промежуточные, поверхностные и безъядерные поверхностные. Типы клеток указываются в процентах. Доминирование поверхностных (также называемых ороговевшими) клеток является результатом эстрогенной стимуляции вагинального эпителия (Schutte 1967).

Результаты предварительных наблюдений показали, что увеличение длины вульвы на 4,0 мм произошло как минимум за несколько дней до эструса и спаривания. Таким образом, непрерывная видеозапись с интервальной съемкой с инфракрасным освещением в ночное время (как описано в London et al.1998), началось, когда это увеличение было впервые обнаружено, и продолжалось до 2 дней после спаривания. Для диагностики беременности через 2–4 недели после наблюдения за спариванием выполняли трансабдоминальное ультразвуковое сканирование (Aloka 500V, датчик с линейной матрицей 7,5 МГц; Corometrics, Medical Systems, Wallingford, Connecticut).

Ожидалось, что повышение уровня эстрадиола будет связано с проэструсом и эструсом. Устойчивое повышение уровня прогестерона указывало на то, что овуляция произошла и, как предполагалось, было связано с активностью желтых тел во время беременности или в лютеиновую фазу у небеременных.Уровни эстрадиола и прогестерона, выделяемые с калом, сравнивали с уровнями, измеренными в сыворотке.

Образцы крови брали из яремной вены один раз в месяц, начиная с января 1996 г. Сыворотку отделяли центрифугированием и хранили в криопробирках при -75°C до радиоиммунологического анализа. Небольшой размер вен затруднял получение образцов сыворотки, и считалось, что более частые попытки забора крови приведут к повреждению вен, что может полностью исключить возможность взятия проб. Отбор проб раз в месяц не казался чрезмерно стрессовым для лисиц и не повреждал вены. Однако гормональные изменения в периовуляторный период могут происходить очень быстро, поэтому гормоны также измеряли в образцах кала, которые можно было собирать чаще. Каждую неделю самок отделяли от самцов на 20 минут и кормили мясным фаршем, содержащим красные пластиковые шарики (диаметром 3 мм, Cabela’s Inc., Сидней, Небраска), чтобы отличить образцы фекалий самцов и самок. Все фекалии, находившиеся в клетке, собирали через 24 часа, а фекалии самок хранили в пластиковых пакетах для замораживания при температуре -75°C до анализа.

Фекальные стероиды солюбилизировали с использованием модификации метода Shideler et al. (1993) Баумана и Хардина (1998). Приблизительно 0,5 г фекального материала встряхивали в течение ночи в 5 мл модифицированного фосфатно-солевого буфера, содержащего 50% метанола, 0,1% альбумина бычьей сыворотки и 5% Tween 20 (монолаурат полиоксиэтиленсорбитана, поверхностно-активное вещество). После центрифугирования супернатанты декантировали и хранили при -70°C до анализа. Твердое вещество, оставшееся во флаконах для экстракции, взвешивали после сушки в течение ночи при 100°С.

Уровни эстрадиола в сыворотке и фекалиях определяли количественно с использованием набора Ultra-Sensitive Estradiol DSL-4800 (Diagnostic Systems Laboratories, Webster, Texas). Антитело имеет высокое сродство к эстрадиолу и низкую перекрестную реактивность с другими встречающимися в природе эстрогенами (2,4% эстрона, 0,20% эстрона-β-d-глюкуронида, 0,01% эстрона-3-сульфата, 0,34% эквилина, 3,40% d-эквиленина, 0,21 % 17α-эстрадиола, 0,21% 16-кетоэстрадиола, 2,56% 17β-эстрадиол-3-глюкуронида, 0,17% эстрадиола-3-SO ₄ и 0.64% эстриола). Анализ имеет чувствительность 2,2 пг/мл с самым низким используемым стандартом, равным 3 пг/мл. Коэффициент вариации внутри анализа составил 7,48%, а коэффициенты вариации между анализами для 4 отдельных внутренних контролей составили 16,5%, 14,2%, 14,0% и 15,9% для сыворотки и 20,27%, 17,95%, 16,58% и 21,76% для сыворотки. анализы кала.

Прогестерон измеряли с помощью набора Active Progesterone DSL-3900 (Diagnostic Systems Laboratories). Перекрестная реактивность антител: прогестерон, 100%; 5μ-прегнан-3,20-дион, 6%; 11-дезоксикортикостерон, 2.5%; 17μ-гидроксипрогестерон, 1,2%; 5β-прегнан-3,20-дион, 0,80%; 11-дезоксикортизол, 0,48%; и 20α-дигидропрогестерон, 0,10%. Анализ имеет чувствительность 0,12 нг/мл, при этом 0,4 нг/мл является самым низким используемым стандартом. Коэффициент вариации внутри анализа составил 4,5%, а коэффициенты вариации между анализами для 3 внутренних контролей составили 9,8%, 6,1% и 7,2% для сыворотки и 14,29%, 9,31% и 10,24% для кала.

Различия в уровнях эстрадиола и прогестерона между беременными и ложнобеременными самками (нормированные по дням спаривания) во время анэструса, проэструса и беременности были протестированы с помощью дисперсионного анализа с повторными измерениями (ANOVA).Тесты множественного сравнения Тьюки-Крамера проводились при обнаружении значительных различий (NCSS 2000, Statistical System for Windows). Результаты представлены как среднее значение ± 1 SE .

Результаты

Характер концентраций прогестерона и эстрадиола был сходным в образцах кала и сыворотки (рис. 2, прогестерон), что позволило нам полагаться на образцы кала, которые можно было собирать чаще. Десять эстральных периодов (1–4 у самки), сопровождавшихся спариванием, были зарегистрированы у 4 из 6 самок (рис.3). Пятая (самка 1b), по-видимому, находилась в течке, когда ее добавили к исследованию, и ее повышенный уровень эстрадиола и прогестерона в фекалиях предполагал, по крайней мере, еще 1 эстральный период, но спаривания у нее не наблюдалось. У самки 4 за 26 месяцев наблюдения за ней был 1 период повышенного содержания эстрадиола и прогестерона в кале (рис. 3), что свидетельствует о возможных эстральных и диэстральных фазах, но она также не спаривалась.

Рис. 2.

Сравнение уровней прогестерона в сыворотке и фекалиях у представительной самки фенека (самка 2) в течение 2-летнего периода

Рис. 2.

Сравнение уровней прогестерона в сыворотке и фекалиях у репрезентативной самки фенека, содержащейся в неволе (самка 2), в течение 2-летнего периода

Рис. 3.

Характеристика концентраций эстрадиола и прогестерона в фекалиях у всех содержащихся в неволе самок лисиц на протяжении всего исследования (спаривание указано тонкими стрелками, а роды — толстыми стрелками)

Рис. для всех самок фенека, содержащихся в неволе на протяжении всего исследования (спаривание указано тонкими стрелками, а роды — толстыми стрелками)

Из 10 наблюдаемых эстральных периодов с спариванием первый день спаривания приходится на 6.5 ± 0,73 дня (диапазон 2–9 дней) после 1-го увеличения отека вульвы (изменение ≥4 мм). Ни у одной женщины ни в области промежности, ни в вагинальных мазках кровянистых выделений обнаружено не было. Все 10 эстральных периодов, сопровождавшихся спариванием, сопровождались беременностью, что было подтверждено ультразвуковым исследованием через ≤3 нед после спаривания (наиболее раннее выявление в 19 дней). Детеныши родились через 50,3 ± 0,26 дня (от 49 до 51 дня) после спаривания.

Различий между концентрациями эстрадиола у беременных и небеременных женщин не было.Однако у неспаренных самок устойчивое повышение уровня прогестерона в кале последовало за увеличением вульвы, что свидетельствует об овуляции, но уровни были значительно ниже, чем уровни, измеренные во время беременности ( F = 5,78, df = 1, 53, P < 0,05). ).

Изменения размера вульвы и процентного содержания типов клеток в вагинальных мазках также оценивались путем нормализации данных в течение дня спаривания лисиц (рис. 4 и 5). Количество точек данных для каждого дня варьировалось, поскольку образцы собирались 3 раза в неделю, а не ежедневно.Таким образом, при привязке к дню спаривания все даты отбора проб не совпадали. Как размер вульвы, так и процент поверхностных эпителиальных клеток были максимальными во время спаривания лисиц. Увеличение размера вульвы было более постепенным, чем увеличение процента поверхностных клеток, и поэтому было не только диагностическим, но и прогностическим признаком эструса.

Рис. 4.

Изменения цитологии влагалища (средний процент ± SE поверхностных эпителиальных клеток плюс безъядерные поверхностные эпителиальные клетки) у 4 содержащихся в неволе самок фенека в течение 10 эстральных периодов, день спаривания обозначен как день 0.Резкое увеличение процентного содержания поверхностных клеток совпало с эструсом с днем ​​спаривания, обозначенным как день 0. Резкое увеличение процента поверхностных клеток совпало с течкой

Рис. 5.

Изменения размера вульвы (длина × ширина, среднее значение ± SE ) у 4 содержащихся в неволе самок фенека в течение 10 эстральных периодов, нормализованные к дню спаривания (день 0)

Рис.5.

Изменения размера вульвы (длина × ширина, среднее значение ± SE ) у 4 содержащихся в неволе самок фенека в течение 10 эстральных периодов, нормализованные к дню спаривания (день 0)

В 8 из 10 эстральных циклов только 1 копулятивный замок. Средняя продолжительность этих блокировок составляла 1 час 47 минут (± 17 минут), в диапазоне от 26 минут до 2 часов 45 минут. В остальные 2 эстральных периода наблюдались множественные копулятивные запоры: по 1 в каждый из 3 дней подряд у самки 1а и по 2 в один и тот же день у самки 3 (табл. 1).Только 2 из 13 копулятивных запоров (табл. 1) имели место в рабочее время (07–17 ч), да и то непосредственно не наблюдались, а были видны только на видео.